激素调控矮牵牛离体再生花瓣的研究

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1、山东农业大学硕士学位论文激素调控矮牵牛离体再生花瓣的研究姓名：吴晓青申请学位级别：硕士专业：发育生物学指导教师：李兴国;张宪省20070610英文缩略表英文缩写英文名称中文名称6-BA6-Benzyladenine6-苄基腺嘌呤bpBasepair碱基对eDNAComplementaryDNA互补DNA链ddH20Distilledanddeionizedwater重蒸水DEPCDiethylpyrocarbonate焦碳酸二乙酯DNADeoxyribonucleicacid脱氧核糖核酸dNTPDcoxyribonuclcosidetriphosphat脱氧核糖核营三磷脂EBEthidi

2、umbromide溴化乙锭EDTAEthylenediaminetetmaceticacid乙二胺四乙酸GUS13-GlucuronidaseB．葡萄糖苷酸酶IAAIndole．3．aceticacid3-吲哚乙酸KanKanamycin卡那霉素LBLllria-BermaimediumLB培养基M．MLVRTMoloney-murineleukemiavirus鼠白反转录酶MSMurashigeandSkoogmcdiemMS培养基PCRPolymerasechainreaction聚合酶链式反应RNARibonucleieacid核糖核酸酶RT-PCRReversetranscrip

3、tionPCR反转录PCR酶SDSSodiumdodecylsulface十二烷基磺酸钠TrisTrishydryxymethy三羟甲基胺基甲烷laminomethane关于学位论文原创性和使用授权的声明本人所呈交的学位论文，是在导师指导下，独立进行科学研究所取得的成果。对在论文研究期间给予指导、帮助和做出重要贡献的个人或集体，均在文中明确说明。本声明的法律责任由本人承担。本人完全了解山东农业大学有关保留和使用学位论文的规定，同意学校保留和按要求向国家有关部门或机构送交论文纸质本和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权山东农业大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可

4、以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。保密论文在解密后应遵守此规定。论文作者签名：导师签名：盘姻日期：冽山东农业大学硕士毕业论文摘要花发育是植物生长发育的关键过程，花的形成和发育一直是人们研究的热点。通过对拟南芥等模式植物的研究，人们总结出了五条开花途径(光周期促进途径、春化促进途径、自主促进途径、GA促进途径和成花抑制途径)和调控花器官形成的ABC模型。在花的形成和发育过程中激素有着重要的调控作用。关于赤霉素对开花的调控作用已有较深入的研究，然而对于细胞分裂素和生长素通过信号转导途径调控花发育的分子机理研究较少。对花叶千年木、风信子、水稻、拟南芥等植物的离体器官再生的

5、研究结果表明，生长素和细胞分裂素参与对花器官发育的调控。本研究以模式植物矮牵牛(Petuniahybrida)为实验材料，建立了激素调控的花瓣离体再生系统。本系统选取单核晚期(花粉时期)的花瓣下部l，3部分为外植体，在施加0．2mg／L6-BA和0．8mg／LIAA的培养基中培养直接再生花瓣获得成功。再生花瓣主要位于外植体的远轴面，有片状花瓣和筒状花冠两种形态；少数位于近轴面，为花瓣突起。花瓣特异表达基因EPFl的启动子驱动G吣表达的分析进一步证实了再生器官为花瓣。形态学观察和组织细胞学分析的结果表明，激素诱导了花瓣再生部位细胞的脱分化。半定量RT-PCR及mRNA原位杂交分析的实验结果

6、表明，激素提高了花瓣决定基因GREEN舾嬲三(G四的表达并起始了花分生组织特征基因ABERRANTLEAFANDFLOWER0三刃的表达。ALF表达的起始标志着花瓣组织细胞脱分化并进入花分生组织状态，并由GP调控重新分化形成花瓣。依据上述结果我们推测，生长素和(或)细胞分裂素可能通过诱导彳三F的表达使细胞脱分化进入花分生组织状态，进而通过提高GP的表达水平决定脱分化细胞的分化方向。关键词：激素；花瓣；离体再生；脱分化；矮牵牛激素调控矮牵牛离体再生花瓣的研究AnalysisofHormone-regulatedinvitroRegeneratedPetalinPetuniaAbstract

7、Floraldevelopmentisthekeyeventofplantdevelopment．Onefloralorganidentitymodel(ABCmodel)andfivegeneticpathwayscontrollingfloweringtime(Photoperiodicpromotionpathway,Vernalizationpromotionpathway,Autonomouspromotionpathwa