海南裸花紫珠高效液相指纹图谱研究

《海南裸花紫珠高效液相指纹图谱研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、广州中医药大学学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是个人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经特别加以注明引用的内容外，本论文不含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明并致谓十。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名二殛R期：仞7修‘月广同关于学位论文使用授权的声明本人完全了解广州中医药大学有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留或向国家有关部门机构送交论文的复印件和电子版，允许被查阅和

2、借阅。本人授权广州中医药大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或其他复印手段保存和汇编本学位论文。(保密论文在解密后应遵守此规定)敝作者签名监论文导师签名出以日期：别够年6月r日摘要目的：为了实现裸花紫珠药材的质量控制，保证该药材及相关制剂的临床应用安全有效，为其进一步开发及生产的可持续性打下坚实的基础，本论文开展了与裸花紫珠药材质量标准相关的：包括文献研究、裸花紫珠药材高效液相色谱法(HPLC)指纹图谱等研究。从而提高裸花紫珠药材质量评价标准，为建立裸花紫珠药材GAP

3、种植基地提供科学的数据支撑，同我国现代中药材质量标准要求与时俱进。方法：课题研究采用具有快速可靠且技术成熟等特点的HPLC法建立裸花紫珠药材指纹图谱。对指纹图谱色谱条件，包括流动相系统、检测波长、梯度洗脱程序及检测时间等；供试品溶液制备方法包括提取方法、提取溶剂种类、提取溶剂用量、提取时间等进行了全方位的考察，以图谱基线、色谱峰的分离度及色谱峰数量等为指标对其进行评价。结合相关文献、保留时间、峰的纯度及紫外吸收光谱图等资料初步确定成分峰的方法，对裸花紫珠指纹图谱中的几个色谱峰进行指认。采用《中药色谱指纹图谱相

4、似度评价系统2004A版》(研究版)软件对采集的海南省共10批裸花紫珠色谱图进行了分析评价，得出指纹图谱共有模式；将11批白沙县不同采收期样品(2010年的3批为野生)之间以及与海南省共有模式图谱进行相似度评价；将海南省另3个地区的指纹图谱共有模式与海南省共有模式比较，观察不同地区与所建立的指纹图谱有无差别；对两种不同气候采收的样品进行分析研究，观察其差异。用已确定的HPLC指纹图谱条件对广东紫珠、大叶紫珠、杜虹花、枇杷叶紫珠等另外4种常用紫珠属植物进行测定，验证裸花紫珠药材HPLC指纹图谱的专属性。结果：试

5、验结果建立的裸花紫珠HPLC指纹图谱条件确定为：色谱柱：AgilentTC—C18(250mmx4．6mm，51am)；流动相系统：乙腈：0．30％乙酸：流速：1．0mL／min；梯度洗脱；柱温：30。C；进样量：20pL；波长：254nm。供试品处理方法：裸花紫珠药材粉末约2．09，50％甲醇50mL，80。C水浴回流提取30min，过0．459m膜，取续滤液，即得。方法学考察结果：稳定性、精密度、重复性的相对保留时间和相对峰面积RSD％都在3％之下，相似度计算结果都在O．99以上，完全符合中药指纹图谱的技

6、术要求。在裸花紫珠药材HPLC指纹图谱中，确立了19个共有峰，建立了海南省裸花紫珠药材指纹图谱共有模式，样品之间以及样品与对照指纹图谱的相似度都很高。相似度计算和系统聚类分析结果表明：白沙县不同采收期的裸花紫珠样品、野生样品与栽培品存在差异；可优先选择临高县、海口市及五指山市建立GAP种植基地；不同气候样品存在差异，且个别样品差异较大，药材的采收期可定在炎热季节(3月～8月)。研究可以初步确定11号峰为毛蕊花糖苷(36．17min)所在位置，16号峰为木犀草素(64．42min)，18号峰为5，4’．二羟基．

7、3，7，3’．三甲氧基黄酮(92．37min)。通过与广东紫珠、大叶紫珠、杜虹花、枇杷叶紫珠4种常用紫珠属品种图谱对比，体现裸花紫珠药材在该条件下具有很好的专属性，可达到对裸花紫珠药材真伪鉴别的目的。结论：本课题首次建立了海南裸花紫珠药材HPLC指纹图谱方法，运用该方法可对药材的整体质量进行控制，并可将裸花紫珠与市场上常用的紫珠属品种区分开，达到体现裸花紫珠药材品种专属性的目的。对不同产地、不同采收期的裸花紫珠药材图谱进行相似度及系统聚类分析评价，可了解其内在差异，结合原有的含量测定等结果，为药材的种植及生产

8、原料选择提供科学依据。关键词：裸花紫珠；HPLC：指纹图谱IITheresearchaboutHPLCFingerprintofCaI／icarpanudiflorainHainanprovinceSpeciaIty：ChinesetraditionaImediCiReAuthor：SiyaoMaTutor：Prof．MingshengLiUAbstractObjectiveInordertoach