流动注射—化学发光法分析黄姜活性成分的应用研究

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1、分类号：Q946.8单位代码：10720密级：公开学号：1007100110硕士学位论文流动注射—化学发光法分析黄姜活性成分的应用研究AppliedresearchofactiveingredientanalysiswithCL-FIAdetectioninYam论文作者：屈亚娟指导教师、职称：杨培君教授学科、专业名称：植物学研究方向：植物天然产物研究二〇一四年五月陕西理工学院学位论文独创性声明本人声明所呈交的学位论文是我在导师的指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除文中已经注明引用的内容外，论文中不包含其他个人已经发表或撰写过

2、的研究成果，也不包含为获得陕西理工学院或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中作了明确说明并表示谢意。作者签名：年月日陕西理工学院学位论文使用授权声明本人同意研究生在校攻读学位期间论文工作的知识产权单位属陕西理工学院。本人保证毕业离校后，发表本论文或使用本论文成果时署名单位仍为陕西理工学院。学校有权保留学位论文并向国家主管部门或其它指定机构送交论文的电子版和纸质版；有权将学位论文用于非赢利目的的少量复制并允许论文进入学校图书馆、院系资料室被查阅；有权将学位论文的内容编入有关数据库进行检索；有

3、权将学位论文的标题和摘要汇编出版。本学位论文属于1、保密□，在______年解密后适用本授权书。2、不保密√□。（请在以上相应方框内打―√‖）作者签名：年月日摘要黄姜即盾叶薯蓣（DioscoreszingiberensisC.H.Wright），为薯蓣科薯蓣属多年生草本植物，是我国特有的薯蓣类型。其根状茎主含薯蓣皂苷元等多种植物次生代谢产物，目前主要作为提取皂素的资源植物。本论文以陕西城固县栽培种植的黄姜块根为研究材料，采用醇提薯蓣皂苷，酸解获得薯蓣皂苷元和醇提黄酮类化合物的方法，利用流动注射-化学发光法（CL-FIA）对其含量进行测定，分

4、别建立2种检测黄姜薯蓣皂苷元和黄姜黄酮类化合物的化学发光体系，并开展了方法学验证；所得结果与高效液相色谱法和紫外分光光度法进行了比较分析，论文主要研究结果如下。（1）CL-FIA法分析黄姜薯蓣皂苷元的研究4+研究发现，薯蓣皂苷元可以被Ce氧化而产生较弱的化学发光信号，罗丹明6G对4+该发光信号有微弱的增强作用，从而建立了Ce-罗丹明6G体系的CL-FIA法检测黄姜中薯蓣皂苷元的新方法。在最佳的实验条件下，薯蓣皂苷元浓度在40~200μg/mL范围内与发光强度成线性关系，检出限为0.057μg/mL。对10μg/mL的薯蓣皂苷元标准溶液平行测

5、定11次，RSD=2.41%。黄姜薯蓣皂苷元得率平均值为1.125%，RSD=3.69%，平均回收率为99.8%。酸性KMnO4具有微弱的化学发光，薯蓣皂苷元可以增强其化学发光信号。据此建立了KMnO4体系的CL-FIA法检测黄姜中薯蓣皂苷元的新方法。在最佳的实验条件下，薯蓣皂苷元浓度在40~200μg/mL范围内与发光强度成线性关系，检出限为0.076μg/mL。对10μg/mL的薯蓣皂苷元标准溶液平行测定11次，RSD=3.02%。黄姜薯蓣皂苷元得率平均值1.008%，RSD=2.08%，平均回收率为98.9%。采用HPLC色谱法对黄姜

6、中薯蓣皂苷元进行检测，薯蓣皂苷元浓度在40~200μg/mL范围内与峰面积成线性关系，对40μg/mL的标准溶液平行测定5次，RSD=0.63%。黄姜薯蓣皂苷元平均得率为1.808%，RSD=2.18%，平均回收率为101.1%。分别采用CL-FIA法和HPLC色谱法对黄姜中薯蓣皂苷元进行检测对比，研究结果发现，化学发光法得到的薯蓣皂苷元含量略低于高效液相色谱法测得的薯蓣皂苷元含量。结果分析表明，影响CL-FIA法检测精确性的因素较多，其中发光剂和氧化剂的影响作用显著。CL-FIA法检测黄姜薯蓣皂苷元定量的精确性不如HPLC色谱法，但前者i

7、具有快速、简单，低成本等优势。（2）CL-FIA法分析黄姜黄酮类化合物的研究黄酮类化合物是植物多酚的代谢产物，具有清除自由基、抗衰老、抗氧化等作用。2+根据其对H2O2的清除作用，建立Luminol-H2O2-Cu体系的CL-FIA法定量检测黄姜中黄酮类化合物的方法。在最佳的实验条件下，芦丁浓度在4.4~22.0μg/mL范围内与发光-3强度成线性关系，检出限为1.1×10μg/mL。对1.0μg/mL的芦丁标准溶液平行测定11次，得到RSD=2.50%。黄酮类化合物得率平均值为0.113%，RSD=1.35%，平均回收率为98.1%。4+

8、在酸性介质中，Ce可以氧化Na2SO3产生化学发光，黄酮类化合物对该体系具有4++微弱的抑制作用。据此建立Ce-Na2SO3-H体系的CL-FIA法对其进行定量检测。在最佳的实验