microrna-210对缺氧状态下肾癌细胞增殖、凋亡和侵袭影响及其分子机制的研究

《microrna-210对缺氧状态下肾癌细胞增殖、凋亡和侵袭影响及其分子机制的研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、分类号UDC密级博士学位论文MicroRNA-210对缺氧状态下肾癌细胞增殖、凋亡和侵袭的影响及其分子机制研究TheregulatingofmicroRNA-210onproliferation,apoptosisandinvasioninrenalcancercellsanditsmolecularmechanism作者姓名：李松超学科专业：临床医学(外科学)院、系（所）：湘雅二医院指导老师：赵晓昆教授论文答辩日期？雄,hi答辩委员会主席中南大学二?一二年五月原创性声明本人声明，所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研

2、究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了论文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人己经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得中南大学或其他单位的学位或证书而使用过的材料。与我共同工作的同志对本研究所作的贡献均已在在论文中作了明确的说明。作者签名：泰私Uy日期：1^3}U年t月过日关于学隹抡文使用援权说明本人了解中南大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留学位论文并根据国家或湖南省有关部门规定送交学位论文，允许学位论文被查阅和借阅；学校可以公布学位论文的全部或部分内容，可以采用复印、缩印或其它手段保存学位论

3、文。同时授权中国科学技术信息研究所将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》，并通过网络向社会公众提供信息服务。"f乂()作者签名：导师签名1^日期：7力七年r月日博士学位论文中文摘要MicroRNA-210对缺氧状态下肾癌细胞增殖、凋亡和侵袭的影响及其分子机制研究摘要第一章microRNA-210在肾脏透明细胞癌中的表达及其与临床病理分期、分级的相关性研究目的：探讨microRNA-210(miR-210)在肾透明细胞癌(clearcellrenalcellcarcinoma,ccRCC)中的表达及其意义。方法:用实时

4、定量PCR技术检测15例ccRCC及癌旁非肿瘤组织中miR-210的表达情况，研究其与ccRCC病理分期、分级之间的关系。结果：实时定量PCR发现，15例ccRCC患者与配对的癌旁非肿瘤组织相比，miR-210在肿瘤组织中的表达100%上调，其中miR-210在ccRCC中的相对表达量为7.16：±0.63，在癌劳非肿瘤组织中相对表达量2.27土0.54，两者表达有显著统计学差异（尸<0.01)。15例ccRCC标本中，根据病理分期分级进行分组，I期肾癌中miR-210的相对表达量为7.24±0.66，II-III期肾癌中

5、为7.60土0.64，两者相比没有显著差异（P>0.05)。高分化组肾癌中miR-210的相对表达量为7.06±0.69，中-低分化组肾癌中为7.21±0.63，两者相比没有显著差异（P>0.05)。结论：1、ccRCC中miR-210的表达水平较癌旁非肿瘤组织明显上调，博士学位论文中文摘要暗示miR-210可能参与ccRCC的发生发展，miR-210表达水平的检测有助于肾癌早期诊断。2、ccRCC中miR-210的表达水平与病理分期分级无关。关键词肾透明细胞癌，microRNA-210，分期，分级博士学位论文中文摘要第

6、二章microRNA-210对缺氧状态下肾癌细胞生物学性状的影响目的：miR-210对缺氧状态下肾癌细胞细胞增殖、侵袭能力和细胞凋亡等生物学性状的影响。方法:实时定量PCR检测常氧、缺氧状态下肾癌细胞株(ACHN)中及正常肾小管上皮细胞株（HK2)中miR-210的表达。釆用Lipofectamine?2000转染hsa-mir-210inhibitor于缺氧48h的肾癌细胞株ACHN中，敲低miR-210的表达，实时定量PCR检测转染后miR-210表达，MTT法、Transwell侵袭实验和AnnexinV/PI双染法

7、分别观察细胞增殖、侵袭能力及细胞凋亡的变化。结果：常氧状态下正常肾小管上皮细胞株HK2和肾癌细胞株ACHN细胞中miR-210的相对表达量分别为1.47和3.43。缺氧状态12h、24h和48h肾癌细胞株ACHN细胞中miR-210的相对表达量分别为4.59、5.30和7.20。肾癌细胞ACHN常氧组，缺氧组，缺氧抑制组3组比较实验，缺氧抑制组转染hsa-mir-210丨nhibitor，缺氧条件下培养48h后，结果显示与缺氧组相比，缺氧抑制组中miR-210的相对表达量显著降低(尸<0.05)。用MTT法检测细胞的生长抑

8、制率，细胞侵袭实验检测其侵袭能力，流式细胞术检测其凋亡率，发现转染hsa-mir-210inhibitor12h、24h、48h后，在各个时间点和常氧组相比，缺氧组细胞相对存活率显著升高（尸<0.05);在各个时间点和常氧组及缺氧组相比，缺氧抑制组细胞相对存活率显著降低（P<0.05)。Transwel