小麦胚芽清蛋白提取工艺及分子量测定 硕士论文

小麦胚芽清蛋白提取工艺及分子量测定 硕士论文

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时间:2017-07-26

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1、小麦胚芽清蛋白提取工艺及分子量测定摘要:小麦胚芽清蛋白是一种优质蛋白质,为了充分开发利用小麦胚芽资源,通过单因素试验和正交试验对清蛋白提取工艺进行了研究,得到最佳提取条件为粉碎粒度0.125mm,提取温度30℃,提取时间30min,提取料液比1︰11,此条件下提取清蛋白占麦胚蛋白29.2%。清蛋白SDS-PAGE凝胶电泳包含7条条带,分子量分别为20.89、28.84、38.02、43.65、51.29、60.26、72.44Ku.此方法实现了对小麦胚芽清蛋白最大程度的提取。关键词:小麦胚芽,清

2、蛋白,提取率,电泳ExtractiontechniqueofwheatgermalbuminanddeterminationofmolecularweightDIAODa-peng1,HUANGJi-hong1,2*,lIJin3,HOUYin-chen2(1.He,nanUniversityofTechnology,Zhengzhou450001,China2.He,nanprovinceFoodIndustryResearchInstitution,Zhengzhou450000,China

3、3.HenanCaixincompany.Dancheng477150,China)Abstract:Wheatgermalbuminisaniceprotein.Todevelopwheatgermdeeply,theexperimentresearchitsextractiontechniquebysingle-factorexperimentandorthogonalexperiment.Theoptimalextractionconditionismeshnumber0.125mm,te

4、mperature30℃,time30min,solid-liquidratio(g/ml)1︰11.Inthiscondition,theratioofextractedwheatgermalbumininwheatgermproteinis29.2%.SDS-PAGEElectrophoresisofalbumincontainssevenbands.Molecularweightsare20.89、28.84、38.02、43.65、51.29、60.26、72.44Ku.Bythiswa

5、y,wheatgermalbuminisextractedsufficiently.Keywords:wheatgerm;albumin;extractionefficiency;electrophoresis小麦胚芽占小麦籽粒的2%~3%,是小麦的生命源泉,是整个麦粒营养价值最高的部分[1],被营养学家誉为“人类天然的营养宝库”[2-3]。麦胚中的总蛋白含量高达30%左右,是一种完全蛋白,它含有人体必需的8种氨基酸[4,5],占总氨基酸的34.74%[6],而且必需氨基酸的相互比值与FAO/W

6、HO颁布的模式基本接近[7,8]。小麦胚芽各种蛋白质中,清蛋白评分最高,具有最高的蛋白质效率比(PER)、体外消化率(IVPD)和较好的氨基酸组成,是一种优质蛋白质[9,10]。10小麦胚芽虽然具有高的营养价值,但因其高色泽和脂肪酶含量,混入面粉会降低面粉白度,不利于面粉贮藏,在制粉中被去除掉[11,12],造成了资源的严重浪费。为充分地开发利用小麦胚芽清蛋白资源,朱科学、纪莹优化了清蛋白提取pH、料水比、温度、时间[13],周惠明研究了水溶性蛋白中的糖蛋白性质[14-15]。本文对小麦胚芽清蛋

7、白提取时的粉碎粒度、料水比、温度、时间进行了研究,并在此基础上制得蛋白含量较高的清蛋白粗粉及精粉,通过SDS-PAGE凝胶电泳测定了组成清蛋白亚基分子量,为进一步开发清蛋白提供了参考。1材料与方法1.1实验材料与实验器材新鲜小麦胚芽河南财鑫集团第二制糖厂;BM523蛋白电泳Marker生工生物工程有限公司;硫酸铵、冰乙酸、氯化钠、Tris、Acr、Bis、SDS、TEMED、甘氨酸、过硫酸铵、蔗糖、巯基乙醇、溴酚蓝、考马斯亮蓝、甲醇。THZ-100B摇床上海-恒科学仪器有限公司;L-55台式低速

8、大容量离心机湖南湘仪实验仪器开发有限公司;XY-200型高速多功能粉碎机浙江省永康市松青五金工具厂;反渗透膜系统福建赛普特膜技术有限公司;DYY-III型电泳槽和DYY-III2稳压稳流电泳仪北京市六一仪器厂;23-10箱式电阻炉北京市永光明医疗仪器厂;LGJ-10台式冷冻干燥机北京松源华兴科技发展有限公司;索氏提取仪、凯氏定氮仪。1.2实验方法1.2.1水分含量测定按GB5009.3-20101.2.2灰分测定按GB5009.4-20101.2.3蛋白质含量测定及提取率计算蛋白质含量测定按GB

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