奈达铂联合放射治疗对人鼻咽癌5-8f细胞作用的实验研究

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1、万方数据AthesissubmittedtoZhengzhouUniversityforthedegreeofMasterTheExperimentalStudyonRadiationSensitizationinHumanNasopharygealCarcinoma5—8FCellsbyNedaplatinByXiaoxingQiSupervisor：Prof．GuozhenShiRadiationOncologyBasicMedicalCollegeApril2014万方数据原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导F，独立进行研究

2、所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的科研成果。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本声明的法律责任由本人承担。j学位论文作者：郡略日期&Df睁占月Et学位论文使用授权声明本人在导师指导下完成的论文及相关的职务作品，知识产权归属郑州大学。根据郑州大学有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留或向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅；本人授权郑州大学可以将本学位论文的全部或部分编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或者其他复制手段保存论文和汇编本

3、学位论文。本人离校后发表、使用学位论文或与该学位论文直接相关的学术论文或成果时，第一署名单位仍然为郑州婵。骼敝掷骺麟剥蝴匙⋯瀛珊砒日期：如f￥年杉月{EI万方数据摘要奈达铂联合放射治疗对人鼻咽癌5．8F细胞作用的实验研究研究生祁晓星导师师国珍教授郑州大学基础医学院放射医学郑州大学第一附属医院放疗科郑州450052摘要目的：通过体外实验研究奈达铂单独或联合x．射线对人鼻咽癌5．8F细胞的细胞增殖动力学影响以及作用机制，初步探讨奈达铂作为放射增敏药物的可能性，为临床上鼻咽癌放射增敏治疗提供实验基础。方法：本实验应用MTT法检测奈达铂对人鼻咽癌5．8F细胞的细

4、胞增殖动力学影响，并求得ICl0为后续试验提供适合药物浓度：利用细胞克隆形成实验首先得到低剂量奈达铂对人鼻咽癌5．8F细胞的最佳照射时间(T)，进而根据合适药物浓度和最佳照射时间再次进行细胞克隆形成实验，并根据实验数据绘制细胞生存曲线，求得放射敏感性相关参数，观察奈达铂的放射敏感性；应用流式细胞术观察低剂量奈达铂单独或联合x一射线对人鼻咽癌5—8F细胞周期及细胞凋亡的影响，运用免疫细胞化学法检测低剂量奈达铂单独或联合x一射线对人鼻咽癌5．8F细胞凋亡蛋[刍Fas表达的影响，以探讨其作用机制。结果：万方数据摘要1．MTT法结果显示：分别用不同浓度奈达铂(1

5、、2、4、8、16、32I．tg／m1)作用人鼻咽癌5．8F细胞24h后，细胞增殖被不同程度的抑制，增值抑制率分别为11．40％、30．63％、38．01％、65．68％、73．43％、81．92％，随药物浓度增加及药物作用时间延长，奈达铂对人鼻咽癌5．8F细胞增殖抑制作用增强。根据细胞增殖抑制率，应用SPSSl7．0软件求得奈达铂对人鼻咽癌5．8F细胞的IC50为5．640}tg／ml，ICl0为1．128pg／ml。2．细胞克隆形成实验结果显示：最佳照射时间T为24d,时，根据实验数据应用Sigmaplotl2．0软件绘制细胞生存曲线，求得放射敏感性

6、相关参数(Do、Dq、N)：单纯放疗组的参数分别为：1．453Gy、1．216Gy、2．289；llxg／ml奈达铂+放疗组分别为：DO值为0．947Gy、Dq值为0．701Gy、N值为2．087，根据公式计算放射增敏比(SER)，1}tg／ml奈达铂+放疗组放射增敏比(SER)SERD0、SERDq、SERSF2分别为1．537、1．690、2．068。3．流式细胞术检测结果显示：(1)X．射线(0Gy、2Gy、4Gy、6Gy、8Gy)单纯或联合奈达铂作用鼻咽癌5．8F细胞后，其细胞凋亡情况改变应用SPSSl7．0进行统计分析，奈达铂+放疗组细胞凋亡率

7、较单纯放疗组显著升高(尸<0．05)，。(2)X．射线(0Gy、2Gy、4Gy、6Gy)单纯或联合奈达铂作用鼻咽癌5．8F细胞后，其细胞周期G2／M期分布改变应用SPSSl7．0进行统计分析，奈达铂+放疗组细胞凋亡率较单纯放疗组显著升高(尸<0．05)。4．细胞免疫化学染色结果显示：x．射线(0Gy、2Gy、4Gy、6Gy)单纯或联合奈达铂作用鼻咽癌5．8F细胞后，其细胞Fas蛋白表达情况应用SPSSl7．0进行统计分析，奈达铂+放疗组细胞Fas蛋白阳性表达率较单纯放疗组显著上调(P<0．05)。结论：1．低剂量奈达铂可提高人鼻咽癌5．8F细胞的放射敏感

8、性，其机制可能与低剂量奈达铂可上调细胞内的Fas蛋白表达，从而诱导人鼻咽癌5．8