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1、第31卷第2期中山大学学报(医学科学版)V01.3lNo.22010年3月JOURNALOFSUNYAT—SENUNIVERSITY(MEDICALSCIENCES)Mall2O1OAMPK对心肌细胞FOXO3a转录因子活性以及泛素连接酶MAFbx表达的影响陈保林一,蒙荣森,马跃东,熊肇军。,张成喜,陈广琴,刘晨,董吁钢(1。中山大学附属第一医院心血管医学部,广东广州510080;2.贵州省人民医院心内科,贵州贵阳550002;3.中山大学附属第三医院心内科.广东广卅I510630)摘要:【目的】研究5一氨基一4甲酰胺咪唑核糖核苷酸(AICAR)对心肌细胞转录因子FOXO3a的活
2、性以及泛素连接酶MAFbx蛋白表达的影响,探讨AMP激活的蛋白激酶(AMPK)在心肌细胞蛋白质降解中所起的作用。【方法】用不同浓度AICAR干预培养的新生大鼠心肌细胞6h,观察AICAR对心肌细胞AMPK的激活作用。再将培养的心肌细胞分成3组:对照组,AICAR组,AICAR+CompoundC组。用Westernblot检测AMPK激活对心肌细胞FOXO3a转录因子活性,以及MAFbx蛋白表达的影响。【结果】①与对照组比较,0.25mmol/L与0.5mmol/LAICAR处理6h后心肌细胞AMPK活性升高(P<0.05),而1.0mmol/L与2.0mmol/LAICAR组A
3、MPK活性增加更明显(P<0.O1)。②与对照组比较,AICAR激活AMPK后显著增加FOXO3a转录活性(P<0.01),促进MAFbx蛋白表达(P<0.O1),而特异性的AMPK抑制剂CompoundC则明显抑制了该作用。【结论】AMPK可能通过激活心肌细胞FOXO3a的转录活性,上调MAFbx蛋白表达,参与心肌细胞蛋白质降解的调控。关键词:心肌;蛋白水解:AMPK;FOXO3a;MAFbx中图分类号:R329.25;Q591.2文献标志码:A文章编号:1672—3554(2010)02—0190—05EfectsofAMPKonTranscriptionalActivity
4、ofFOXO3aandExpressionofUbiquitinLigaseMAFbxinCardiomyocytesCHENBao.1in,,MENGRong-Sell,MAYue—dong,XIONGZhao-jun,ZHANGCheng-xi,CHENGuang—qin,LIUChen,DONGYu—gang(1.DepartmentofCardiology,TheFirstAfiliatedHospitalofSunYat—SenUniversity,Guangzhou510080,China;2.DepartmentofCardiology,ThePeople’SHos
5、pitalofGuizhouProvince,Guiyang550002,China;3.DepartmentofCardiology,TheThirdAfiliatedHospitalofSunYat—SenUniversity,Guangzhou510630,China)Abstract:【Objective】Thisstudywasdesignedtoinvestigatetheeffectsof5-aminoimidazole一4一carboxamideribonucteoside(AICAR)onactivityoftranscriptionfactorForkhead
6、O3a(FOXO3a)andexpressionofubiquitinligasemuscleatrophyF·box(MAFbx),andtoexploretheroleofadenosinemonophosphate—activatedproteinkinase(AMPK)onproteolysispathwaysincardiomyocytes.【Methods】TheeffectofAICARonactivationofAMPKwasobserved.CulturedneonatalratcardiomyocyteswastreatedwithAICARindiffere
7、ntconcentration.Culturedcardiomyocyteswerethendividedintothreegroups:contmlgroup,AICARgroup,AICAR+CompoundCgroup.EffectsofAMPKactivationonphosphorylationofFOXO3aandexpressionofMAFbxincardiomyocytesweredetectedusingWesternblot.【Results】①Compar
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