对含中药龙血竭的血清处理方法研究

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5、用适宜蛋白沉淀剂并以有机溶剂提取处理含中药龙血竭的血清样品,测定含药血清的HPLC图谱,以龙血竭溶液中5个特征成分的峰面积为对照计算提取率,确定制备含药血清的最佳方法。结果通过乙腈沉淀蛋白,采用乙酸乙酯进行提取,可使含药血清中龙血竭特征成分的提取率达到80%以上。结论本法可作为龙血竭含药血清的制备方法。【关键词】龙血竭;含药血清;蛋白沉淀龙血竭为传统中药,是龙舌兰科植物剑叶龙血树含树脂木材的乙醇提取物。龙血竭总黄酮(sanguisdraconisflavones,SDF)是从龙血竭中提取得到的主要成分,包括黄酮、二氢黄酮、黄烷、查耳酮、二氢查耳酮等20

6、多种化合物。动物实验表明,龙血竭总黄酮能对抗整体动物心肌缺血损伤。本实验将龙血竭HPLC图谱中特征峰较明显的5个成分的峰面积作为检测指标(其中2个主要成分为龙血素A和龙血素B),以龙血竭原溶液为对照计算体外加样后提取百分率,进行血清处理方法的研究。1、仪器与试剂Waters高效液相色谱仪:515HPLC泵,2487双波长吸收监测器,N2000双通道色谱工作站(浙江大学智能信息工程研究所);TDL802B台式离心机(上海安亭科学仪器厂);超声仪(上海超声波仪器厂);TU1810紫外可见分光光度计(北京普析通用仪器有限责任公司);ZH2BLENDE

7、R涡旋混合器(天津药典标准仪器厂)。广西产龙血竭(广西中医学院制药厂提供);龙血素A、龙血素B对照品(中国药品生物制品检定所提供);乙腈(色谱纯);甲醇,乙酸乙酯,丙酮,正丁醇,乙醚,三氯甲烷,正戊醇,95%乙醇,无水乙醇,三氯醋酸,均为分析纯;新西兰大耳白兔(广东省医学实验动物中心提供)。2、HPLC法的建立2.1色谱条件色谱柱:DiamonsilC18(5μm,250mm×4.6mm);保护柱:EasyguardC18ReplacementCartridgesCat#6101;流动相:乙腈1%冰醋酸(体积比38∶62);检测波长:280nm;流速

8、:1.2mL/min。2.2溶液的制备7---------------------------