医药学药学毕业论文 含中药龙血竭的血清处理方法研究

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1、湖南师范大学本科毕业论文考籍号：XXXXXXXXX姓名：XXX专业：医药学药学论文题目：含中药龙血竭的血清处理方法研究指导老师：XXX二〇一一年十二月十日作者：周晔，金描真，易军，曾伟坚【摘要】目的研究含中药龙血竭的血清处理方法。方法采用适宜蛋白沉淀剂并以有机溶剂提取处理含中药龙血竭的血清样品，测定含药血清的HPLC图谱，以龙血竭溶液中5个特征成分的峰面积为对照计算提取率，确定制备含药血清的最佳方法。结果通过乙腈沉淀蛋白，采用乙酸乙酯进行提取，可使含药血清中龙血竭特征成分的提取率达到80%以上。结论本法可作为龙血竭含药血清的制备方法。【关键词】龙

2、血竭；含药血清；蛋白沉淀　　Abstract:ObjectiveToestablishamethodforthetreatmentofserumofrabbitsfedwithDracaena.MethodsVariousproteinprecipitatorsandorganicsolventswereusedtoprocesstheserumsamples.HPLCwasusedtodeterminethetargetsubjects.Fivechemicalsandtheircharacteristicpeakswereusedtoeval

3、uatethetreatmentprocessoftheserum.ResultsTheaveragerecoveryofDracaena’smajorcomponentsreached80%afterprecipitatedbyacetonitrilefirstandthenextractedbyethylacetate.ConclusionThemethodprovidesareliableapproachtopreparetheserumcontainingDracaena.　　Keywords:Dracaenacochinchinesis

4、(Lour.)S.C.Chen；herbserum；proteinprecipitation　　龙血竭为传统中药,是龙舌兰科植物剑叶龙血树［Dracaenacochinchinensis(Lour)S.C.Chen］含树脂木材的乙醇提取物［1］。龙血竭总黄酮（sanguisdraconisflavones,SDF）是从龙血竭中提取得到的主要成分［2］，包括黄酮、二氢黄酮、黄烷、查耳酮、二氢查耳酮等20多种化合物［3］。动物实验表明，龙血竭总黄酮能对抗整体动物心肌缺血损伤［2］。本实验将龙血竭HPLC图谱中特征峰较明显的5个成分的峰面积作为检测指标

5、（其中2个主要成分为龙血素A和龙血素B），以龙血竭原溶液为对照计算体外加样后提取百分率，进行血清处理方法的研究。　　1仪器与试剂　　　　Waters高效液相色谱仪：515HPLC泵,2487双波长吸收监测器,N2000双通道色谱工作站（浙江大学智能信息工程研究所）；TDL802B台式离心机（上海安亭科学仪器厂）；超声仪（上海超声波仪器厂）；TU1810紫外可见分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司）；ZH2BLENDER涡旋混合器（天津药典标准仪器厂）。　　　　广西产龙血竭（广西中医学院制药厂提供）；龙血素A、龙血素B对照品（中国药品生

6、物制品检定所提供）；乙腈（色谱纯）；甲醇，乙酸乙酯，丙酮，正丁醇，乙醚，三氯甲烷，正戊醇，95%乙醇，无水乙醇，三氯醋酸，均为分析纯；新西兰大耳白兔（广东省医学实验动物中心提供）。　　2HPLC法的建立　　2.1色谱条件　　　　色谱柱：DiamonsilC18（5μm,250mm×4.6mm）；保护柱：EasyguardC18ReplacementCartridgesCat#6101；流动相：乙腈1%冰醋酸（体积比38∶62）；检测波长：280nm；流速：1.2mL/min。　　2.2溶液的制备　　　　取龙血素A、龙血素B对照品适量，用甲醇分别

7、配制成每1mL含10μg的溶液，作为对照品溶液。　　　　取广西龙血竭，用甲醇配制成每1mL含2mg的溶液，0.45μm微孔滤膜滤过，续滤液作为供试品溶液。　　2.3线性范围　　　　将龙血素A对照品溶液分别配制成浓度为0.925、4.625、9.250、13.875、18.500、23.125μg/mL的溶液，进样10μL,记录色谱图，进样量（m）与峰面积（A）的回归方程为：A=45064451m-10379768，r=0.9992，线性范围为9.25～231.25ng。　　　　同上，将龙血素B对照品溶液分别配制成浓度为0.947、4.735、9.

8、470、14.205、18.940、23.675μg/mL的溶液，进样10μL,记录色谱图，进样量（m）与峰面积（A）的回归方程为：A=