大白菜dreb类转录因子cdna的克隆及植物表达载体的构建

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1、华北农学报2009,24(1):6973大白菜DREB类转录因子cDNA的克隆及植物表达载体的构建李妍,申书兴,轩淑欣,李晓峰,王彦华(河北农业大学园艺学院,河北保定071001)摘要:以干旱处理的大白菜自交系851为材料,利用RTPCR技术获得了大白菜DREB类转录因子基因的cDNA编码序列,命名为BcDREB1(GenBank登录号为:EU924266)。序列分析表明,BcDREB1核苷酸序列长663bp,编码214个氨基酸,含有一个典型的AP2结构域,具有DREB转录因子的典型特征。将该基因的cDNA编码序列连接到植物表达载体pCAMBIA2301中,

2、成功构建了大白菜BcDREB1基因的植物表达载体pCAMBcDREB1,为进一步通过转基因技术研究该基因的功能奠定了基础。关键词:大白菜;DREB转录因子;基因克隆;植物表达载体中图分类号:Q785文献标识码:A文章编号:1000-7091(2009)01-0069-05CloningthecDNAofDREBlikeTranscriptionFactorfromChineseCabbageandConstructionofPlantExpressionVectorLIYan,SHENShuxing,XUANShuxin,LIXiaofeng,WANGYa

3、nhua(CollegeofHorticulture,AgriculturalUniversityofHebei,Baoding071001,China)Abstract:ThecDNAofDREBtranscriptionfactornamedBcDREB1(GenBankaccessionnumberEU924266)wasobtainedfromChinesecabbageinbredline851underthedroughtstressbyRTPCRmethod.Thesequenceanalysisindicatedthattheclonewascon

4、sistedof663nucleotides(nt),coding214aminoacids.ThededucedprimarystructureofBcDREB1containedasingleAP2domainandshowedthetypicalcharacteristicsofDREBgenefamily.AplantexpressionvectoroftheBcDREB1genewasconstructedandnamedpCAMBcDREB1,inwhichtheCDSsequenceofBcDREB1wascontrolledbytheCaMV35Spromo

5、ter.ThisworklaidthefoundationsforfuturetransgenicresearchonBcDREB1genefunction.Keywords:Chinesecabbage;DREBtranscriptionfactor;Genecloning;PlantexpressionvectorDREB(Dehydrationresponsiveelementbinding)类个CBF4,而CBF4是与CBF/DREB1很相似的同源[6][7][8]转录因子能够特异性地与DRE(脱水应答)元件结物。以后相继在甘蓝型油菜、小麦、水稻、大合,参与调控

6、植物抵抗干旱、低温和高盐等逆境的信豆[9]、烟草[10]、甜瓜[11]、棉花[12]、甘薯[13]、芥菜[14]等号途径,在植物对逆境胁迫的抗性方面具有重要功作物中克隆了几十个CBF/DREB转录因子基因,这[1,2][3]能。Liu等通过酵母单杂交技术,从拟南芥中些编码CBF/DREB转录因子的基因分别受低温、干克隆了3个受低温诱导表达的转录因子,定名为旱或盐的诱导。DREB1A、DREB1B和DREB1C;同时,克隆了2个在由于植物的抗逆性属于复杂的数量性状,用单干旱、高盐胁迫下诱导表达的转录因子,定名为一的功能基因转化植物其效果往往有限。而一个[4]DREB2A和DR

7、EB2B。后来发现与Stockinger等分DREB转录因子可以调控多个与植物抗逆相关功能离到的CBF(Crepeat/DREbindingfactor)家族有对应基因的表达,因此利用DREB转录因子来改良植物关系,DREB1A即是CBF3,DREB1B和DREB1C分别[15]抗逆性能获得更为理想的效果。迄今已获得了[5]为CBF1和CBF2。Haake等从拟南芥中克隆到一多种转不同来源DREB基因的转基因植物,明显提收稿日期:2008-10-13基金项目:河北省自然科学基金(C2006000416);河北农

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