北京某医院鲍曼不动杆菌临床分离株耐药性及分子流行病学的研究

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1、河北医科大学学位论文使用授权及知识产权归属承诺本学位论文在导师(或指导小组)的指导下，由本人独立完成。本学位论文研究所获得的研究成果，其知识产权归河北医科大学所有。河北医科大学有权对本学位论文进行交流、公开和使用。凡发表与学位论文主要内容相关的论文，第一署名单位为河北医科大学，试验材料、原始数据、申报的专利等知识产权均归河北医科大学所有。否则，承担相应的法律责任。研究生签名：徐钥导师签章：二二级研究生学位论文独创性声明本论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果，除了文中特别加以标注等内容外，文中不包含其他人已发表或撰写的研究成果，指导教师对此进行

2、了审定。本论文由本人独立撰写，文责自负。研究生签名：徐ijij导师签章：弓月q日目录中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯l英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯3研究论文‘北京某医院鲍曼不动杆菌临床分离株耐药性及分子流行病学的研究引言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯6第一部分应用多重PCR方法分析碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌的部分耐药机制前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯8一月IJ舌⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

3、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯8结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯11附图⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯12附表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯14讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯27小结⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯28第二部分应用MLST技术鉴定北京某三甲医院多重耐药鲍曼不动杆菌的主要流行克隆谱系前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯29刚吾⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯29材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

4、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯29结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯31附图⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯34附表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯40讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯44小结⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯45参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯46结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯50综述鲍曼不动杆菌耐药基因的研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯51致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

5、⋯⋯⋯⋯59个人简历⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯60中文摘要北京某医院鲍曼不动杆菌临床分离株耐药性及分子流行病学的研究摘要目的：鲍曼不动杆菌(Acinetobacterbaumannii)是一种革兰阴性非发酵菌，广泛存在于医院环境中，如医护人员手部、呼吸机设备、患者用具、透析机、消毒液，甚至水龙头等，是最常见的条件致病菌之一；该菌可以导致多种医院感染，如伤口感染、肺炎、败血症和脑膜炎等。近几年随着抗菌药物的广泛应用，鲍曼不动杆菌耐药株逐年增加，并从对单一抗菌药耐药向多重耐药、由低耐药向高耐药发展。尤其是多重耐药鲍曼不动杆菌的出现，

6、为抗感染疾病的有效治疗提出了严峻的挑战，因此对鲍曼不动杆菌耐药机制及流行病学研究已成为国内外的热点。本次研究采用多位点序列分型(Multilocussequencetyping，MLST)，多重PCR(multiplexpolymerasechainreaction，M．PCR)对菌株的部分耐药机制、群体遗传学结构及菌株变异情况进行研究，期待为鲍曼不动杆菌的流行病调查提供新的数据。方法：2002到2009年期间收集北京某三甲医院不同科室，不同时期患者的不同标本分离得到的多重耐药鲍曼不动杆菌341株。首先，对所有菌株采用苯酚．氯仿提取方法提取基因组DNA；

7、然后，应用多重PCR方法鉴定导致鲍曼不动杆菌碳青霉烯类耐药的主要相关基因，OXA23型、OXA58型、OXA69型、OXAl43型、OXA51型和OXA24型；最后，采用MLST对341株分离株的7个等位基因进行分析，获得各个分离株的等位基因谱(allelicprofile)并ll序列型(sequencetype，ST)。随后以ST型和等位基因谱为基础，利用Bionumerics6．6、START2．0、RDP3．0、MEGA和eBURST等软件对鲍曼不动杆菌的群体遗传学结构进行深入分析。结果：341株测试菌株中，b／aoxA．51-lik。基因携带率为

8、97．95％，与初始鉴定不符率是2．05％。多重PCR发现了18种耐药基因组合，