化浊解毒方含药血清经p38mapk、jnk通路调节大鼠肝星状细胞α-sma的实验研究

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2、文由本人独立撰写，文责自负。研究生签名：主长明面导师签章：矽

3、苫年≥月)f)日目录IIIl[1llLIIIIIIIIIllllJlll[Ihlll[111111111IY2337375中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯··1英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯4英文缩写⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯8研究论文化浊解毒方含药血清经p38MAPK、JNK通路调节大鼠肝星状细胞仅．SMA的实验研究前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯9日lJ吾⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

4、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·lO结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯··17附图⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯20附表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯··23讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯··25结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯··32参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·32综述p38MAPK和JNK信号传导通路与肝纤维化的研究进展⋯⋯⋯36致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

5、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯48个人简历⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯49中文摘要化浊解毒方含药血清经p38MAPK、JNK通路调节大鼠肝星状细胞仅．SMA的实验研究摘要肝纤维化是各种肝损害因素长期不能解除，致肌成纤维细胞激活，胶原代谢失衡，肝脏组织发生重构的一种病理过程，是各种慢性肝病进展为肝硬化的必经阶段。多种原因引发的慢性肝病严重威胁着我国人民的健康，寻求有效的抗肝纤维化药物是当前的研究热点。如今，许多研究将肝星状细胞作为抗肝纤维化的中心环节，但尚无特异的治疗方法。中医药抗肝纤维化凭借简、便、廉、验的特点为国内外学者广泛关注。李佃贵教授经多年的临床及实

6、验发现，在肝纤维化形成中“浊毒"起着关键作用，运用化浊解毒法组方进行治疗取得了较好的疗效，但是化浊解毒方的作用机制仍不明确。目的：本实验采用血清药理学方法，在细胞水平上观察了Q．SMAmRNA、p38MAPK及JNK蛋白的表达，进而探讨化浊解毒方治疗大鼠肝纤维化的体外作用机制，为化浊解毒方可能存在的治疗靶点及途径提供了分子生物学基础，从以方测证的角度对慢性肝病浊毒证的发病机制提供现代药理学依据。方法：健康成年SD大鼠，制备含药血清，随机分为四组：正常对照组、阳性对照组即复方鳖甲软肝片组、化浊解毒方组即等效剂量和二倍剂量。体外培养原代的肝星状细胞分为：正常对照组(A组)、TGF．[31组(B组)

7、、阳性对照组(C组)、化浊解毒方含药血清等效剂量组(D1组)和二倍剂量组(D2组)，除正常对照外各组均加TGF．[31干预，各组加入相应血清，培养24、48、72h后，运用MTT法检测肝星状细胞的增殖；培养48h后，运用RT-PCR法检测肝星状细胞中仅．SMAmRNA的表达，Western．blot法检测P．p38、P．JNK蛋白的表达。结果：1MTT法检测结果显示：外源性刺激TGF．[31干预的HSC在各组药物血清处理24小时后，与A组比较，B组TGF．[31可明显刺激HSC中文摘要的增殖，差异有统计学意义(尸

8、义(尸