人胚胎关节软骨来源的间充质干细胞 - 副本

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1、北京大学学报(医学版)JOURNALOFPEKINGUNIVERSITY(HEALTHSCIENCES)Vol.36No.3June2004·281··论著·人胚胎关节软骨来源的间充质干细胞1,2△2212崔颖,王宏,徐天睿,李学佩,李凌松(北京大学1.第三医院耳鼻喉科2.干细胞研究中心,北京100083)[关键词]软骨,关节;间充质干细胞;细胞培养;细胞分化[摘要]目的:研究从人胚胎关节软骨中分离的细胞的特性、对其表面标志进行鉴定,探讨其多向分化潜能。方法:从12~20周人胚胎关节软骨中分离细胞,观察细胞的形态、生

2、长状态,采用流式分析的方法对其表面标志进行鉴定并探讨其成骨、成脂、成软骨以及成神经元样细胞的多向分化的潜能。结果:(1)从人胚胎关节软骨中分离的细胞,细胞形态均一,以梭形为主,生长旺盛,可传20代。(2)对不同代的细胞进行流式鉴定,发现其表面标志CD44、CD147、CD90为阳性,CD34、CD45、HLA2DR为阴性,与骨髓来源的间充质干细胞的表面标志相似。(3)对其进行成骨、成脂、成软骨、成神经元样细胞的诱导,发现软骨来源的细胞具有多向分化的能力。结论:从人胚胎关节软骨中可获得间充质干细胞。[中图分类号]R32

3、912[文献标识码]A[文章编号]16712167X(2004)0320281206Stemcellcharacteristicsofhumanfetalarticularcartilage2derivedcells1,2△2212CUIYing,WANGHong,XUTian2rui,LIXue2pei,LILing2song(1.DepartmentofOtorhinolaryngology,PekingUniversityThirdHospital,21StemCellResearchCenter,Health

4、ScienceCenter,PekingUniversity,Beijing100083,China)KEYWORDSCartilage,articular;Mesenchymalstemcells;Cellculture;CelldifferentiationSUMMARYObjective:Toverifythehypothesisthatcellswithcharacteristicssimilartobonemarrowmes2enchymalstemcells(MSCs)canbeisolatedandcu

5、lturedfromhumanfetalarticularcartilage.Methods:Hu2manfetalarticularcartilageswereharvestedfromfetusesabortedbetween12and20weeks.CellsweregrowninmonolayerculturesinIMDMmediumcontainingantibiotics,L2glutamineandfetalcalfserum.Cellswereinducedtodifferentiateintoad

6、ipocytes,osteoblasts,chondrocytes,andneurons.Atvarioustimepoints,parentalandpassagedcellsweresubjectedtoFACSanalysistodeterminecellphenotype.Results:Wesuc2cessfullyisolatedandculturedMSCsfromhumanfetalarticularcartilage.Thesecellshadthesamemorpholo2gy,phenotype

7、,andabilitytodifferentiateinvitroasMSCsofbonemarroworigin.Conclusion:ThisstudyshowsthatcellswithcharacteristicsofMSCscanbeisolatedandculturedfromhumanfetalarticularcartilage.(JPekingUniv[HealthSci],2004,36:281-286)我们采用胰酶、胶原酶消化的方法对人胚胎关112试剂节软骨进行消化,采用低密度培养法,获得一种形

8、态32异丁基212甲基黄嘌呤(IBMX,Sigma公司),消单一的、增殖旺盛的细胞,对其进行流式鉴定,发现炎痛(Indomethacin,Sigma公司)β,2磷酸甘油钠(Sig2其与骨髓来源的间充质干细胞的表面标志很相近,ma公司),BHA(丁酸羟基茴香醚,Sigma公司),TGF2且具有成骨、成脂、成软骨、成神经元样细胞的多向β(RD公司)

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