低频低能量超声联合微泡对人前列腺癌细胞pc-3生物学行为的影响

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1、上海交通大学博#辫莲敝低频低能量超声联合微泡对人前列腺癌细胞PC．3生物学行为的影响学生姓名：白文坤指导教师：胡兵教授学科专业：影像医学与核医学研究方向：超声治疗申请学位：博士学号：0107259276培养单位：上海交通大学附属第六人民医院论文提交日期：2013年4月关键词：低频超声，微泡，前列腺癌，凋亡，侵袭，转移资助基金项目：国家自然基金面上项目(81271597)上海市科委重大基础研究项目(10JC1412600)Schoolcode：10248ShanghaiJiaoTongUniversityDoctoralDisserationTheeffecto

2、fbiologicalbehaviorinhumanprostatecancercellsPC-3bylow-frequencylow—energyultrasoundcombinedwithmicrobubblestherapyAuthor：BaiWen．．kunAdvisor：Prof．HuBingSpecialty：ImagingandNuclearMedicineResearchField：UltrasoundTherapyDegree：DoctorTrainingUnit：ShanghaiNo．6People’SHospitalofShanghaiJ

3、iaoTongUniversitySubmittingdate：April，2013KeyWords：Lowfrequencyultrasound；Microbubbles；Prostatecancer；Apoptosis；Invasion；MetastasisFundation：NationalNaturalScienceFoundation(81271597)，MajorinfrastructureprojectsofShanghaiScienceandTechnologyundergrant(10JCl412600)上海交通大学学位论文原创性声明本人郑重

4、声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体己经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名1n洲呻／一1日期：矽，?年j产月今日上海交通大学学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权上海交通大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检

5、索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。保密口，在一年解密后适用本授权书。本学位论文属于f不保密日。(请在以上方框内打“4”)学位论文作者签名：么氧洒指剥雠：蟛日期■1＼年y月c}日日期：驯弓年厂月尸日低频低能量超声联合微泡对人前列腺癌细胞PC．3生物学行为的影响摘要目的：对超声功率、辐照时间、微泡／细胞悬液体积比参数进行优化，确定超声联合微泡诱导人前列腺癌细胞PC．3的凋亡的最优参数组合并且探讨超声联合微泡对人雄激素非依赖型前列腺癌细胞PC．3凋亡及侵袭转移的影响、探讨其机制。方法：(1)选定超声功率、辐照时间、微泡／细胞悬液体积比三因素

6、，超声功率(实验中分组采用电功率15mW／cm2、20mW／cm2、25mW／cm2、30mW／cm2等分分组，论文中采用实测功率描述)：46mW／cm2，78mW／cm2，138mW／cm2，199mW／cm2。辐照时间：30s，60s，90s，120s。微泡／细胞悬液体积比：10％，20％，30％，40％。每因素4个水平设定正交设计表，按正交设计表所列实验进行超声辐照，辐照后细胞继续培养24小时，用流式细胞仪进行细胞凋亡检测，确定最优参数。(2)利用第一步优化的参数，以频率21kHz、声强为46mW／cm2超声，采用连续波，辐照人前列腺癌PC．3细胞悬液。

7、实验分3组：对照组、单纯超声组和超声联合微泡组(加声诺维200}．t1)。辐照后，CCK．8、细胞集落实验检测对细胞增殖的影响；辐照后培养24h，透射电镜及TUNEL染色、流式细胞仪检测细胞凋亡，实时定量PCR及Western．blot检测对Bcl．2、Bax表达的影响。(3)利用第一步优化的参数，以频率21kHz、声强为46mW／em2超声，采用连续波，辐照人前列腺癌PC．3细胞悬液。实验分3组：对照组、单纯超声组和超声联合微泡组(加声诺维200I-t1)。辐照后，CCK．8绘制细胞生长曲线；辐照后培养12h，Transwell小室模型进行细胞体外侵袭及转移

8、实验，实时定量PCR及Western．