金露梅提取物抗2型糖尿病作用及机制研究.pdf

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1、分类号密级公开UDC学号20151013030青海师范大学硕士学位论文金露梅提取物抗2型糖尿病作用及机制研究研究生姓名李美华导师姓名(职称)曾阳,教授申请学位类别理学申请学位名称硕士学科专业名称植物学研究方向名称药用植物资源论文提交日期2018年4月论文答辩日期2018年6月学位授予单位青海师范大学学位授予日期2018年7月答辩委员会主席彭敏(教授)评阅人(职称)陈志(教授),魏登邦(教授)金露梅抗2型糖尿病作用及机制研究摘要通过α-淀粉酶抑制剂(AMI)、α-葡萄糖苷酶抑制剂(AGI)和醛糖还原酶抑制剂(ARI)体外筛选模型,研

2、究金露梅(Potentillafruticosa)对3种酶的抑制活性作用;体内测定金露梅对小鼠的最大耐受量和餐后血糖的影响,以及对2型糖尿病(T2DM)大鼠空腹血清内胰岛素(INS)、胰高血糖素(GC)、瘦素(LEP)、C反应蛋白(CRP)的影响,采用荧光半定量RT-PCR技术、Livak法,检测并分析大鼠胰岛素(INS)、抵抗素(Resistin)、瘦素(LEP)及糖代谢相关酶的表达量,探讨金露梅抗T2DM的作用机制。1、采用10倍蒸馏水浸提方法得到水提物(WE);采用甲醇回流提取,石油醚、乙酸乙酯萃取法,对金露梅不同极性部位进

3、行提取。2、体外AMI、AGI和ARI筛选模型实验测得,WE、乙酸乙酯部位(MEE)在3种酶抑制活性实验中表现出最高抑制活性,WE、MEE对AM的半数抑制浓度(IC50)分别为0.432、0.507mg/mL;对AG的IC50分别为0.164、0.466mg/mL;对AR的IC50分别为0.742、1.098mg/mL,11个单体化合物的酶抑制活性结果显示,化合物(3)槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖醛酸、化合物(6)1,6-二-O-没食子酰基-β-D-葡萄糖对AG的抑制活性较好,半数抑制浓度(IC50)分别为0.058、0.362

4、mg/mL。3、最大耐受量实验结果显示,WE及MEE对小鼠的最大耐受量分别为18.75g·Kg-1/d,16.5g·Kg-1/d;小鼠糖耐量实验方法结果显示,WE及MEE高剂量组在给药30、60、90、120min后,能降低用淀粉负荷后小鼠的血糖值(p<0.05,p<0.01),低剂量组在给药30、60min后,能降低用淀粉负荷后小鼠的血糖值(p<0.05)。4、经WE高、中、低剂量给药后的T2DM大鼠,三多一少症状得到改善;血糖观察结果显示,WE高剂量组在给药第45、53、60d时,与模型组相比,差异显著(p<0.05);WE中

5、剂量组在给药第53、60d时,与模型组相比,差异显著(p<0.05);WE低剂量组在给药第60d时,与模型组相比,差异显著(p<0.05)。5、经金露梅水提物(WE)治疗后的T2DM大鼠,INS含量高于模型组大鼠,GC、LEP、CRP含量均低于模型组大鼠。6、与T2DM大鼠模型组相比,WE高剂量组大鼠Resistin、LEP、G6pase基因mRNA表达明显下降(p<0.01),INS、GK基因mRNA表达明显增加(p<0.05);WE中剂量组大鼠Resistin、LEP、G6pase基因mRNA表达明显下降(p<0.05,p<0

6、.01,p<0.05),INS、GK基因mRNA表达明显增加(p<0.05);WE低剂量组大鼠Resistin、LEP、G6pase基因mRNA表达明显下降(p<0.01,p<0.01,Ip<0.05),INS、GK基因mRNA表达明显增加(p<0.05)。研究结果表明,金露梅可促进胰岛素与胰高血糖素的相互调节作用,对小鼠口服糖耐量实验有改善作用,可促进胰岛素分泌,提高胰岛素敏感性,具有降血糖功效。关键词:金露梅,α-淀粉酶抑制剂,α-葡萄糖苷酶抑制剂,醛糖还原酶抑制剂,2型糖尿病动物模型,餐后血糖,分子机制IIStudyonth

7、emechanismofeffectofPotentillafruticosaintreatmentoftype2diabetesmellitusAbstractFirstly,theinhibitioneffectsofpotentillafruticosaextractionon3kindsofenzymeswereresearchedthroughtheextracorporealscreeningmodelofprune-amylaseinhibitor(AMI),post-processingenzymeinhibito

8、r(AGI)andaldosereductaseinhibitor(ARI)invitro.Secondly,theeffectsofPotentillafruticosaextractiononthemaximumtoleranceandpost

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1、分类号密级公开UDC学号20151013030青海师范大学硕士学位论文金露梅提取物抗2型糖尿病作用及机制研究研究生姓名李美华导师姓名(职称)曾阳,教授申请学位类别理学申请学位名称硕士学科专业名称植物学研究方向名称药用植物资源论文提交日期2018年4月论文答辩日期2018年6月学位授予单位青海师范大学学位授予日期2018年7月答辩委员会主席彭敏(教授)评阅人(职称)陈志(教授),魏登邦(教授)金露梅抗2型糖尿病作用及机制研究摘要通过α-淀粉酶抑制剂(AMI)、α-葡萄糖苷酶抑制剂(AGI)和醛糖还原酶抑制剂(ARI)体外筛选模型,研

2、究金露梅(Potentillafruticosa)对3种酶的抑制活性作用;体内测定金露梅对小鼠的最大耐受量和餐后血糖的影响,以及对2型糖尿病(T2DM)大鼠空腹血清内胰岛素(INS)、胰高血糖素(GC)、瘦素(LEP)、C反应蛋白(CRP)的影响,采用荧光半定量RT-PCR技术、Livak法,检测并分析大鼠胰岛素(INS)、抵抗素(Resistin)、瘦素(LEP)及糖代谢相关酶的表达量,探讨金露梅抗T2DM的作用机制。1、采用10倍蒸馏水浸提方法得到水提物(WE);采用甲醇回流提取,石油醚、乙酸乙酯萃取法,对金露梅不同极性部位进

3、行提取。2、体外AMI、AGI和ARI筛选模型实验测得,WE、乙酸乙酯部位(MEE)在3种酶抑制活性实验中表现出最高抑制活性,WE、MEE对AM的半数抑制浓度(IC50)分别为0.432、0.507mg/mL;对AG的IC50分别为0.164、0.466mg/mL;对AR的IC50分别为0.742、1.098mg/mL,11个单体化合物的酶抑制活性结果显示,化合物(3)槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖醛酸、化合物(6)1,6-二-O-没食子酰基-β-D-葡萄糖对AG的抑制活性较好,半数抑制浓度(IC50)分别为0.058、0.362

4、mg/mL。3、最大耐受量实验结果显示,WE及MEE对小鼠的最大耐受量分别为18.75g·Kg-1/d,16.5g·Kg-1/d;小鼠糖耐量实验方法结果显示,WE及MEE高剂量组在给药30、60、90、120min后,能降低用淀粉负荷后小鼠的血糖值(p<0.05,p<0.01),低剂量组在给药30、60min后,能降低用淀粉负荷后小鼠的血糖值(p<0.05)。4、经WE高、中、低剂量给药后的T2DM大鼠,三多一少症状得到改善;血糖观察结果显示,WE高剂量组在给药第45、53、60d时,与模型组相比,差异显著(p<0.05);WE中

5、剂量组在给药第53、60d时,与模型组相比,差异显著(p<0.05);WE低剂量组在给药第60d时,与模型组相比,差异显著(p<0.05)。5、经金露梅水提物(WE)治疗后的T2DM大鼠,INS含量高于模型组大鼠,GC、LEP、CRP含量均低于模型组大鼠。6、与T2DM大鼠模型组相比,WE高剂量组大鼠Resistin、LEP、G6pase基因mRNA表达明显下降(p<0.01),INS、GK基因mRNA表达明显增加(p<0.05);WE中剂量组大鼠Resistin、LEP、G6pase基因mRNA表达明显下降(p<0.05,p<0

6、.01,p<0.05),INS、GK基因mRNA表达明显增加(p<0.05);WE低剂量组大鼠Resistin、LEP、G6pase基因mRNA表达明显下降(p<0.01,p<0.01,Ip<0.05),INS、GK基因mRNA表达明显增加(p<0.05)。研究结果表明,金露梅可促进胰岛素与胰高血糖素的相互调节作用,对小鼠口服糖耐量实验有改善作用,可促进胰岛素分泌,提高胰岛素敏感性,具有降血糖功效。关键词:金露梅,α-淀粉酶抑制剂,α-葡萄糖苷酶抑制剂,醛糖还原酶抑制剂,2型糖尿病动物模型,餐后血糖,分子机制IIStudyonth

7、emechanismofeffectofPotentillafruticosaintreatmentoftype2diabetesmellitusAbstractFirstly,theinhibitioneffectsofpotentillafruticosaextractionon3kindsofenzymeswereresearchedthroughtheextracorporealscreeningmodelofprune-amylaseinhibitor(AMI),post-processingenzymeinhibito

8、r(AGI)andaldosereductaseinhibitor(ARI)invitro.Secondly,theeffectsofPotentillafruticosaextractiononthemaximumtoleranceandpost

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