中华通草蛉内生菌多样性研究.pdf

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1、分类号：密级：公开学号：2015200514单位代码：10759石河子大学硕士学位论文中华通草蛉内生菌多样性研究学位申请人赵辉指导教师王爱英申请学位门类级别理学硕士学科、专业名称微生物学研究方向微生物分子遗传与功能基因组学所在学院生命科学学院中国·新疆·石河子2018年6月ThestudyonendophyticbacteriadiversityOftheChrysoperlasinica(Tjeder)ADissertationSubmittedtoShiheziUniversityInPartialFulfillmentoftheRequirementsfortheDegree

2、ofMasterofNaturalScienceByZhaoHui(Microbiology)DissertationSupervisor：WangAiYingShihezi·Xinjiang·ChinaJune,2018石河子大学学位论文独创性声明及使用授权声明学位论文独创性声明本人所呈交的学位论文是在我导师的指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含其他个人已经发表或撰写过的研究成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中作了明确的说明并表示谢意。研究生签名：时间：年月日使用授权声明本人完全了解石河子大学有关保留、使用学位

3、论文的规定，学校有权保留学位论文并向国家主管部门或指定机构送交论文的电子版和纸质版。有权将学位论文在学校图书馆保存并允许被查阅。有权自行或许可他人将学位论文编入有关数据库提供检索服务。有权将学位论文的标题和摘要汇编出版。保密的学位论文在解密后适用本规定。研究生签名：时间：年月日导师签名：时间：年月日摘要中华通草蛉chrysoperlasinica(Tjeder)是棉田中常见的捕食性昆虫天敌，在我国分布广泛，种群数量庞大。为探讨其内生菌对宿主昆虫的生理功能和微生态学意义，了解中华通草蛉在不同发育阶段的分布规律，其体内微生物组成是否会随着发育时期而发生改变，以及与不同属草蛉(大草蛉)体

4、内微生物组成是否存在差异，对进一步了解其体内的微生物对于宿主的生殖和发育以及环境适应性具有重要意义，并为中华通草蛉的人工培养等提供理论基础。本研究主要是利用16SrDNA基因序列，构建内生菌16SrDNA克隆文库，研究了棉田中中华通草蛉种群体内微生物菌群结构，将不同雌雄的中华通草蛉以及棉田中常见的大草岭体内的微生物进行对比，并采用高通量测序技术对不同发育阶段的中华通草蛉体内微生物多样性进行研究，取得主要研究结果如下：1.中华通草蛉内生菌类群主要分3大：γ变形菌γ-Proteobacteria、α变形菌α-Proteobacteria和β变形菌β-Proteobacteria。按照属

5、划分，中华通草蛉成虫内生细菌主要包含沃尔巴克氏体Wolbachiasp.、立克次氏体Rickettsiasp.、肠杆菌属Enterobactersp.、UnculturedMethyloversatilissp.、沙雷氏菌Serratieaesp.、泛生菌属Pantoeasp.和欧文氏菌Erwiniasp。仅在雌虫中存在Cosenzaeasp.，雄虫中存在醋酸杆菌属Acetobactersp.、Asaiasp.、Rosenbergiellasp.、柠檬酸杆菌属Citrobactersp.。并得到中华通草蛉内生菌的优势菌群为沃尔巴克氏体Wolbachiapipientis，在雌雄成虫

6、中分别占23.2%和18.4%。次优势菌为立克次氏体Rickettsiasp.、肠杆菌属Enterobactersp.的细菌结果证明中华通草蛉存在多种内生菌，雌雄群体中内生菌菌群间存在差异。2.通过构建大田大草蛉内生菌16SrDNA克隆文库，得到在大草蛉体内有不动杆菌属Acinetobactersp.、泛生菌属Pantoeasp.、肠杆菌属UnculturedEnterobactersp.、克雷伯氏菌属klebsiellasp以及Escherichiacoli属的细菌，大草蛉以及中华通草蛉体内都有泛生菌属Pantoeasp.、肠杆菌属UnculturedEnterobactersp

7、.，选取中华通草蛉的次优势菌属肠杆菌并与大草蛉中的肠杆菌测序结果进行同源性分析，肠杆菌属的细菌在中华通草蛉以及大草蛉中具有较高的同源性。3.通过提取七个不同发育阶段中华通草蛉基因组DNA，对16SrRNAV3-V4区测序，共获得用于物种分类的OUT123条，涵盖了8门、16纲、29目、62科、89个属的细菌。微生物多样性分析表明，在不同发育阶段，中华通草蛉内生菌具有较高的细菌多样性，其多样性指数存在差异，不同发育阶段其体内优势菌分布呈现出动态变化。菌群分类发现，变形菌