裂壶藻油脂提取及其DHA的分离纯化的研究.pdf

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1、裂壶藻油脂提取及其DHA的分离纯化的研究学校代码：10264研究生学号：M150250459上海海洋大学硕士学位论文裂壶藻油脂提取及其DHA的分题目：离纯化的研究TheresearchofoilextractionfromSchizochytriumsp.anddocosahexenoic英文题目：acidseparationandpurificationfromSchizochytriumsp.oil专业：食品工程研究方向：水产品加工与质量安全姓名：吴兵兵指导教师：杨贤庆二O一八年月日I上海海洋大学硕士学位论文上海海洋大学硕士学位论文答辩委员会成员名单姓名工作单位职

2、称备注孙恢礼中国科学院南海海洋研究所研究员主席曾庆祝广州大学化学化工学院教授委员徐石海暨南大学生命科学技术学院教授委员郝淑贤中国水产科学研究院南海水产研究所研究员委员戚勃中国水产科学研究院南海水产研究所副研究员委员魏涯中国水产科学研究院南海水产研究所副研究员秘书II裂壶藻油脂提取及其DHA的分离纯化的研究上海海洋大学学位论文原创性声明本人郑重声明：我恪守学术道德，崇尚严谨学风。所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经明确注明和引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品及成果的内容。论文为本人亲自撰写，我对

3、所写的内容负责，并完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名：日期：年月日上海海洋大学学位论文版权使用授权书学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅或借阅。本人授权上海海洋大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。保密□，在年解密后适用本版权书。本学位论文属于不保密□学位论文作者签名：指导教师签名：日期：年月日日期：年月日III上海海洋大学硕士学位论文裂壶藻油脂提取及其DHA的分离纯化的研究摘要裂

4、壶藻（Schizochytriumsp.）又称裂殖壶菌，是一类富含油脂的海洋微藻，生长速度快，易于培养，油脂含量高。裂壶藻油的脂肪酸的组成比较简单，二十二碳六烯酸（DHA）含量比较高，易于提纯，具有十分重要的经济价值和科研价值。本课题所采用的裂壶藻由本实验室人员分离获得。对裂壶藻培养后离心获得湿藻泥，收集湿藻泥经真空冷冻干燥后制得裂壶藻干藻粉。以获得的裂壶藻粉为研究对象，研究了裂壶藻油脂提取工艺及天然抗氧化剂对油脂氧化稳定性的影响。此外，针对裂壶藻油脂中的DHA的分离纯化工艺进行了研究，为裂壶藻油脂的开发利用作参考。主要内容及结果包括:（1）以制得的裂壶藻干藻粉为原料

5、，以清油得率为评价指标，采用两步酶解法来提取油脂。结果表明水酶法提取裂壶藻油的最适工艺条件为：料液比1:7、中性蛋白酶的添加量7%、酶解温度45℃、酶解时间3h、酶解pH6.5；碱性蛋白酶的添加量10%、酶解温度68℃、酶解时间6h、酶解pH9.4。在此条件下裂壶藻油脂的提取率可以达到91.37±0.14%。利用气相色谱-质谱（GC-MS）分析对制得的裂壶藻油进行分析，结果显示裂壶藻油中不饱和脂肪酸含量为44.13%，其中DHA含量为32.06%。（2）对提取所得的裂壶藻油脂采用Schaal烘箱法对其氧化稳定性进行了研究。以过氧化值（POV）和DHA含量变化为油脂氧化

6、稳IV裂壶藻油脂提取及其DHA的分离纯化的研究定性的评价指标，研究五种天然抗氧化剂对裂壶藻油脂氧化稳定性的影响。从中选择三种较优的天然抗氧化剂按一定比例复配得到复配天然抗氧化剂，并对其对裂壶藻油脂的氧化稳定性的影响进行了研究。采用气相色谱-质谱（GC-MS）分析上述实验过程中裂壶藻油脂中DHA含量的变化。研究结果表明：五种抗氧化剂均能提高裂壶藻油脂的氧化稳定性，其中维生素E、迷迭香酸、茶多酚对裂壶藻油的氧化稳定性的提升较大，三种天然抗氧化剂复配比例为Ve：迷迭香酸：茶多酚（2:1:2，m/m/m）时对裂壶藻油脂的氧化稳定性的提升最大，在此条件下15d后裂壶藻油脂的过氧

7、化值为30.25±1.37mmol/kg。且该配比下DHA的量最终为3.32±0.12g/100g。（3）对提取得到的裂壶藻油采用两步高速逆流色谱法进行DHA的分离纯化。先将裂壶藻油脂进行皂化处理，利用高效液相色谱（HPLC）测定不同溶剂体系的K值，最终筛选出正庚烷-乙酸乙酯-甲醇-水（15:1:15:1，V/V/V/V）、正庚烷-甲醇-水（5:6:1，V/V/V）分别为第一步和第二步高速逆流色谱的两相溶剂体系。采用紫外检测器在210nm处进行检测。得到最佳条件为：进样量180mg、流速3mL/min、转速910r/min、温度13℃。在此条件下，利