L-色氨酸和褪黑激素对中华绒螯蟹血糖代谢及免疫性能的影响.pdf

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1、学校代码：10264研究生学号：M150101082上海海洋大学硕士学位论文L-色氨酸和褪黑激素对中华绒螯蟹题目：血糖代谢及免疫性能的影响AnalysisoftheeffectofL-tryptophanandmelatoninonthehemolymphglucose英文题目：metabolismandimmuneperformanceintheEriocheirsinensis专业：水产养殖研究方向：水产动物免疫姓名：徐敏杰指导教师：杨筱珍、成永旭二O一八年四月二日上海海洋大学学位论文原创性声明本人郑重声明：我

2、恪守学术道德，崇尚严谨学风。所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经明确注明和引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品及成果的内容。论文为本人亲自撰写，我对所写的内容负责，并完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名：日期：年月日上海海洋大学学位论文版权使用授权书学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅或借阅。本人授权上海海洋大学可以将本学位论文的全部

3、或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。保密□，在年解密后适用本版权书。本学位论文属于不保密□学位论文作者签名：指导教师签名：日期：年月日日期：年月日上海海洋大学硕士学位论文答辩委员会成员名单姓名工作单位职称备注答辩地点答辩日期上海海洋大学硕士学位论文L-色氨酸和褪黑激素对中华绒螯蟹血糖代谢及免疫性能的影响摘要中华绒螯蟹（Eriocheirsinensis）俗称河蟹、毛蟹和大闸蟹，是一种分布广泛的淡水养殖经济品种。中华绒螯蟹因其味道鲜美而驰名中外、备受青睐，其富含的

4、巨大经济价值也使它名正言顺地成为我国的名特优水产品。近年来，由于中华绒螯蟹的市场需求量日益增长，价格也节节攀升，养殖户们开始争相扩大养殖规模和提高集约化程度，但与此同时也给中华绒螯蟹的养殖业带来了巨大挑战。一系列问题如农药、抗生素的滥用、养殖环境恶化和宿主免疫疲劳等给中华绒螯蟹的养殖带来了极大损失。为了推行健康养殖的理念，我们探究了饲料中添加不同水平的L-色氨酸及其代谢产物——褪黑激素对中华绒螯蟹的血糖代谢及免疫性能的影响，并结合对肠道内菌群多样性的研究，以期为中华绒螯蟹的健康养殖奠定理论基础。（1）投喂中华绒螯蟹

5、4组不同L-色氨酸添加量的饲料（L-色氨酸占比分别为0.36%、0.47%、0.73%和1.05%，分别记为第1、2、3和4组）30天后，测定血糖代谢相关指标、糖酵解反应过程中主要限速酶在组织中的表达量及血清和肝胰腺抗氧化和免疫相关指标。结果显示：饲料中添加不同含量的L-色氨酸对中华绒螯蟹血糖水平无显著影响（P>0.05），平均约为4.62mmol/L。随着饲料中L-色氨酸添加量的增加，肝胰腺糖原含量呈上升趋势，其中第4组蟹肝糖原含量显著高于第1组（P<0.05）。此外，在对中华绒螯蟹糖原磷酸化酶活性进行测定分析时

6、发现L-色氨酸对其影响并不显著（P>0.05）。采用荧光定量PCR分别探究了丙酮酸激酶（Pyruvatekinase,PK）和糖原合成酶激酶3（Glycogensynthasekinase3,GSK3）在中华绒螯蟹十种不同组织（眼柄、胸神经节、脑神经节、肠、肝胰腺、胃、心、血、肌肉和鳃）中的表达情况，发现均有表达但不同组织间的相对表达量差异显著（P<0.05）。PKmRNA在心脏I上海海洋大学硕士学位论文组织中的相对表达量最高，显著高于其他组织（P<0.05），而在眼柄中表达最低。GSK3mRNA在胸神经节中的相对

7、表达量最高，显著高于其他组织（P<0.05），同样的也是在眼柄中表达最低。此外，我们还分析了不同L-色氨酸饲料投喂后，中华绒螯蟹PK和GSK3mRNA在4种不同组织中的表达情况。结果发现：中华绒螯蟹心脏和脑神经节中PKmRNA的相对表达量无明显变化（P>0.05）。但在胸神经节和肌肉组织中，随着饲料中L-色氨酸添加量的增加，PKmRNA的相对表达量也显著上升（P<0.05）。同样地，各组蟹脑神经节中GSK3mRNA的相对表达量也无显著变化（P>0.05），而随着饲料中L-色氨酸含量的提高，胸神经节、心脏和鳃组织中G

8、SK3mRNA的相对表达量较对照组而言有显著提高（P<0.05）。不同L-色氨酸饲料投喂后，中华绒螯蟹血清T-AOC、T-SOD和ACP活力及肝胰腺T-AOC均未发生显著变化（P>0.05），但血清CAT和AKP活性却随着L-色氨酸添加量的增加而呈上升趋势。其中，第4组中华绒螯蟹血清的CAT和AKP活性显著高于第1组（P<0.05）。摄食试验组饲料后中华绒螯