Flg22诱导拟南芥钙信号缺失突变体的筛选.pdf

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1、分类号：Q94单位代码：10346密级：学号：2015111010077硕士学位论文（学术学位）中文论文题目：Flg22诱导拟南芥钙信号缺失突变体的筛选英文论文题目：Flg22-inducedthedefectionofcalciumsignalsmutantsscreeninArabidopsis申请人姓名：杨艺指导教师：裴真明合作导师：朱杉专业名称：植物学研究方向：植物学所在学院：生命与环境科学学院论文提交日期2018年3月杭州师范大学硕士学位论文致谢致谢不知不觉，三年的研究生生涯即将结束。回顾一路历程，有过期待，有过惊喜，也不乏失望，偶有抱怨，但最后所有的情绪都化作感激。感谢在

2、这里经历的一切。首先要感谢裴老师给我一个来这里的机会，我才能来到这里，让我有机会经历这一切。还要感谢我的指导老师朱杉老师，从课题的选题，到实验的指导以及最终论文的撰写。她都给予了我很大的帮助，让我得以顺利完成课题。此外，还要感谢远方老师、柯丽萍老师、刘训言老师、吴飞华老师、滕一波老师、吴晓梅老师、亓果宁老师以及裴晋珍老师在日常生活和实验中认真地帮我解答疑问，让我可以更顺利的进行实验。当然，我还要感谢一起工作学习的伙伴们。这其中给予我最大帮助的就是我的师兄曹孝强，感谢他教会我许多实验技术和原理，还在实验上给我很多建议，让我的实验得以顺利进行。此外，实验室的师兄师姐也在三年间给予了我大量

3、帮助，在此要感谢陈维师兄，张庶师兄，朱易华师兄，裴宋雨师姐，刘源涛师兄，张琪师姐，刘璐璐师姐，买华晨师兄，徐媛媛师姐，霍晓迎师姐。同时也要感谢梁宜，万菂，申洋，蔡云飞，王超这些同窗在学习和生活上给我提供的各种帮助，让我的三年的研究生活更加温暖。当然还要感谢王梦云、伊艳艳等师弟师妹的陪伴与支持。感谢你们！最后，感谢家人的支持和自己的坚持，让我得以有一个圆满的研究生生涯。最后，我必须感谢我的家人，感谢你们对我最大限度的包容与支持，让我能够毫无顾虑的在科研道路上继续前行奋斗，谢谢你们！I杭州师范大学硕士学位论文中文摘要中文摘要病原菌侵害是影响农作物产量重要因素。植物通过质膜或胞内的受体感受

4、这些生物胁迫的存在，触发下游的信号转导，引发相应的免疫反应以抑制病原体的侵害。而作为植物第二信使的钙信号，在植物感受到胁迫初期就会出现，并对下游信号的传递发挥着重要的作用。Flg22作为一个典型的病原体相关的分子模式，其相关的信号转导机制已经被研究的较为清楚。但对于flg22的诱导如何引起胞内钙离子浓度增加的分子机制依然不清楚。本研究以含有可以稳定遗传水母荧光蛋白(AEQUORIN，AQ)基因的拟南芥EMS诱变体作为材料，通过筛选flg22胁迫下钙离子浓度上升缺失的突变体，期望能够得到flg22诱导的钙信号传导通路中的特异性组分。并且通过克隆相应基因，进一步深入探讨植物感受生物胁迫的

5、机理。目前取得的成果如下：1.通过表型筛选、特异性验证，我们得到了flg22诱导的钙信号缺失的候选突变体；2.我们选取其中一个候选突变体进行回交以及BF3的验证，得到该突变体稳定表达的BF3代，并完成了相应的全基因组重测序，目前正在对突变基因进行定位，并初步将该基因定位于四号染色体上；3.通过对突变体生理表型的分析，我们发现筛选得到的突变体对AtPep1和flg22都不敏感，表明该突变基因可能在植物防御中发挥一定的作用；4.通过荧光定量PCR对flg22诱导下PR1基因表达的检测，我们发现植物在应对病害胁迫时，PR1基因表达量会降低。本研究的顺利进行，将为生物胁迫诱导的早期钙信号，以

6、及采用基因工程方法提高农作物抗病性奠定基础，对进一步进行植物抗病育种以及指导农业生产实践具有重要的作用。关键词：植物免疫；flg22；钙信号II杭州师范大学硕士学位论文AbstractAbstractThemicrobialpathogensinvasionisoneofthemainfactorsrestrictingthehighyieldofcrops.Plantsperceptbioticstressesthroughreceptorsintheplasmamembraneorintracellular,whichcantriggerdownstreamsignalpassw

7、ayandactiveimmuneresponses.Calciumsignalingasthesecondmessengeroftheplanttriggeredbystressesintheearlystageandplaysanimportantroleinsignaltransmission.AsatypicalPAMP,itisclearthathowFLS2perceptsflg22.However,howflg22induceintracel