拟南芥植株衰老相关突变体的筛选与初步分析

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1、ScreeningandAnalysisofMutantRelatedtoSenescenceinArabidopsisThalianaADissertationSubmittedtotheGraduateSchoolofHenanUniversityinPartialFulfillmentoftheRequirementsfortheDegreeofMasterofScienceByYangjingSupervisor:Prof.DongfacaiDate:May,2014关于学位论文独立完成和内容创新的声明本人向河南大学提出硕士学住中

2、请。本人郑重声明:所呈交的学位论文是本人在导师的指导下独立完成的,对所研究的课题有新的见解。据我所知,除文中特别加皑说明、标注和致谢的地方外,论文中不包括其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包括其他人为获得任何教育、科研机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同事对本珊究所儆的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。j。。学位申请八-I:

3、学隹鲶褰蒸煮善:篝名:,兰撵一_蟊L_。。·≯0i、二i。i≥..jjj2j0J垮j-年q--、占月,垮日-U—LPl-●、口一●『。0一、j关于学位论文著作权使蔼授权书本人经河南大学审

4、核批准授子颈。士学隹。作为学位论文的作者,本人完全了解并同意河南走学有关保留、。馕闸学罐话囊的要求,即河南大学有权向国家图书馆、科研信息机构、数据收集机构和拳校图书馆等提供学住论文(纸质文本和电子文本)以供公焱检索、查阅。本人授权河南大学出于宣扬、展览学校学术发展和进行学术交流等目的。可蹦采取影印、缩印、扫描和拷贝等复制手段保存、汇编学位论文(甄质文本和电子文本)。(涉及保密内容的学位论文在解密后适用本授权书)学位获得者(学位论文作者)签名::叠盛20J卜年S月№曰学位论文指导教师签名:么耄扯:20I埠年5月f6,日摘要植物衰老是植物生长

5、发育过程中由多种因素综合作用引发的一系列的变化过程,在衰老过程中伴随着一系列的生理变化。由于衰老相关基因的表达,在植物生理表型上显示出各种变化特征,在这些变化中最明显的就是叶绿素含量的变化。由于植株体内叶绿素降解,叶绿素水平下降,叶黄素和胡萝b素相对含量增高,从而在植物叶片上显示出由绿变黄这一变化,称为黄化。这一变化过程往往发生在衰老的初期阶段,而且叶绿素含量的变化与植物衰老之间存在着负相关关系,因此有人认为叶绿素含量的变化可以作为叶片衰老的标志。应用叶绿素荧光成像仪可以比较直观地观测到植物叶片的叶绿素含量变化,根据叶绿素荧光动力学参数可

6、以推测叶片光合作用中的变化。本实验采用叶绿素荧光来作为拟南芥衰老突变体的筛选条件,以T-DNA插入突变体种子作为筛选材料,筛选出两个突变体材料,分别命名为∥J『和向J。经过鉴定,二者都是T-DNA插入突变体,并且经过遗传学分析,结果显示这两个突变体都是单基因隐性突变体。^』在整个生长期都有明显的叶片黄化现象,在叶绿素含量和可溶性蛋白含量等方面与wT有显著差异。∥』的叶绿素荧光表型与WT有显著差异,经过TAIL—PCR克隆基因之后,通过序列比对,发现该突变基因可能与铁、钴等二价金属离子的平衡和跨膜运输相关,经过分析发现T-DNA插入在它的第

7、一个编码框的第一个外显子上,并且T-DNA插入方向和基因方向一致。经过对∥』相关生理指标的检测,发现突变基因引起了生理指标的变化,通过与野生型相比较,结果显示该基因可能与衰老相关。关键词:叶绿素荧光成像,拟南芥,衰老,突变体ABSTRACTPlantsenescenceisaseriesofchangesinplantgrowthanddevelopmentprocesstriggeredbyavarietyoffactors,anditisaccompaniedbyaseriesofphysiologicalchangesinthese

8、nescencingprocess,themostobviousofthesechangesisthechangeinchlorophyllcontent.Withthedegradationofchlorophyllinplant,chlorophylllevelsisdecreased,luteinandcarotenecontentincreased,thusshowingthechangeofleavesfromgreentoyellowinplants,whichcalledyellowing.ThischangeoftenOC

9、CI/I'Sintheearlystagesoftheprocessofsenescence,thischangesbetweenchlorophyllcontentandplantsenes

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