rhorho激酶抑制剂对大鼠肺动脉高压肺血管重构的影响及其机制研究

《rhorho激酶抑制剂对大鼠肺动脉高压肺血管重构的影响及其机制研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、中图分类号：R725.4硕士学位论文Rho/Rho激酶抑制剂对大鼠肺动脉高压肺血管重构的影响及其机制研究院（系）、所临床医学院研究生姓名杨张娅学科、专业儿科学导师姓名刘斌教授二Ο一三年五月目录1Rho/Rho激酶抑制剂对大鼠肺动脉高压肺血管重构的影响及其机制研究…………………………………………11.1中文摘要…………………………………………………11.2Abstract……………………………………………………41.3前言…………………………………………………………81.4材料和方法………………………………………………131.5实验结果………………

2、…………………………………331.6讨论………………………………………………………401.7结论………………………………………………………491.8附图表……………………………………………………501.9参考文献…………………………………………………551.10英文缩写及符号说明……………………………………652致谢………………………………………………………673综述………………………………………………………68Rho/Rho激酶抑制剂对大鼠肺动脉高压肺血管重构的影响及其机制研究摘要目的：采用左肺切除+野百合碱（MCT）项背部皮下注射建立大鼠肺动

3、脉高压动物模型，探讨大鼠肺动脉高压肺血管和心室重构的特点，以及Rho/Rho激酶在转录水平的变化及其活性对肺高压肺血管重构的影响；探讨Rho/Rho激酶抑制剂法舒地尔不同给药方案对大鼠肺动脉高压肺血管重构的作用及其机制，为法舒地尔(fasudil)的临床应用提供实验依据。方法：1、将60只健康雄性SD大鼠（300-350g）随机分为5组（每组12只），即C组：空白对照组，不给与任何处理；J组：假手术组，手术暴露左侧胸腔同左肺切除手术相同时间；M组：模型组，左肺切除+野百合碱(MCT，60mg/kg)项背部皮下注射；F1组：左肺切除+MCT注射，于

4、术后21d给与fasudil(2mg/kg.d)尾静脉注射,每日一次；F2组：左肺切除+MCT注射，于术后7d给与fasudil(2mg/kg.d)尾静脉注射,每日一次。2、术后35d，大鼠腹腔注射10%水合氯醛（0.04ml/kg）进行麻醉，经右侧颈外静脉插管，测定各组大鼠平均肺动脉压力（mPAP）。3、脱颈法处死动物后取下心脏，完整分离右心室游离壁（RV）和左心室+室间隔（LV+S），计算RV/(LV+S)比值了解心室重构情况。4、各组大鼠肺组织行HE染色、SM-α-actin免疫组化染色和Elastin-VanGieson染色，观察肺血管和

5、肺组织的病理学改变，并计算非肌性血管肌化程度、肺小动脉新生内膜增殖度、平1均血管阻塞计分、肺小动脉中膜厚度百分比等体视学指标。5、应用RT-PCR检测各组大鼠肺组织ROCK1和ROCK2mRNA相对表达水平的变化。6、采用Westernblot检测各组大鼠肺组织p-MYPT表达量变化，以了解Rho激酶活性的变化对肺血管重构的影响。结果：1、M组大鼠在实验过程中均出现不同程度的体重不增甚至下降、松毛、活动减少、呼吸急促等。M组有5只死亡，F1组有1只死亡，其余组无死亡，上诉情况表现轻微。2、与C组和J组大鼠比较，M组大鼠的mPAP显著升高[(58.

6、56±3.56vs.22.36±1.75and23.31±1.51)mmHg],差异均有统计学意义（P＜0.001）；给与法舒地尔干预后，与M组大鼠比较，F1组和F2组大鼠mPAP均较M组有不同程度下降[(39.99±4.10and34.76±7.36vs.58.56±3.56)mmHg],差异均有统计学意义(P＜0.01)，且F2组下降更加明显，差异有统计学意义(P＜0.05)。3、与C组和J组大鼠比较，M组大鼠RV/(LV+S)比值分别较C组和J组显著增高(0.61±0.08vs.0.29±0.04and0.31±0.04),差异均有统计学意

7、义（P＜0.001）；给与法舒地尔干预后，与M组比较，F1组和F2组大鼠RV/(LV+S)比值均有不同程度下降（0.46±0.07and0.36±0.08vs.0.61±0.08）,差异均有统计学意义(P＜0.01)，且F2组下降更加明显，差异有统计学意义(P＜0.05)。4、肺组织体视学指标检测，与C组和J组比较，M组WT%、WA%、无肌性血管肌化程度、新生内膜增殖度、VOS显著增高、LA%显著降低，差异均有统计学意义（P＜0.001）；给与法舒地尔干预后，与M组比较，F1组和F2组大鼠WT%、WA%、非肌性小动脉肌化程度、新生内膜增殖度和VO

8、S明显下降，差异均有统计学意义（P＜0.001），2且F2组降低更加明显（P＜0.001）。5、应用RT-PCR检测方法显示M组大鼠RO