pax2在子宫内膜癌中的表达及其dna甲基化调控

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1、万方数据学校代码：10246学号：09211250006PAX2在子宫内膜癌中的表达及其DNA甲基化调控院系：专业。姓名：指导老师：导师组成员：完成日期：妇产科医院妇产科学贾楠冯炜炜副教授李勤副主任医师2013年3月20日学擞大位曰一警後则万方数据英文缩写一⋯⋯⋯⋯⋯⋯．中文摘要～Abstract．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．—j．￡一—j一刖舌⋯⋯一实验材料与方法⋯⋯一一⋯．结果目录一、PAX2在子宫内膜癌中表达的研究二、PAX2在子宫内膜癌中的

2、功能研究三、PAX2启动子区DNA甲基化与其表达的关系四、PAX2启动子区甲基化差异化区域转录因子预测讨论．结论参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯一综述⋯⋯⋯一研究生期间发表文章⋯⋯．致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯一2．．．．．．．．4⋯⋯⋯⋯⋯．5⋯．．15⋯一182649万方数据英文缩写PAX2同源盒基因2Pairedboxgene2P53蛋白53protein53GAPDH3一磷酸甘油醛脱氢酶glyceraldehyde一3一phosphatedehydrogenaseER雌激素受体EstrogenReceptorPR孕激素受体P

3、rogesteroneReceptorDAB3，3一四盐酸二氨基联苯胺3，3’，4，4’一Biphenyltetraminetetrahydrochloride5-Aza-CdR5一氮一2一脱氧胞苷5-Aza一2’一deoxycytidineCCK一8细胞计数试剂盒-8cellcountingkit一8FBSPBS胎牛血清fetalbovineserum磷酸盐缓冲液phosphatebuffersalineTBSTris磷酸盐缓冲液tris—bufferedsalineTSS转录起始位点Transcripti

4、onStartSiteEEC子宫内膜腺上皮细胞endometrialepithelialcell万方数据中文摘要目的：探讨PAX2在子宫内膜癌中的表达、功能及其启动子区DNA甲基化的调控机制。方法：免疫组织化学方法检测PAX2蛋白在人子宫内膜癌组织、各类增生过长组织和正常对照内膜组织中的表达并分析其与临床病理特征之间的关系；小RNA干扰方法敲除子宫内膜癌细胞株中PAX2的表达，CCK．8法、transwell及细胞划痕实验分别检测细胞增殖、侵袭及迁移能力的改变：亚硫酸盐测序法检测细胞株PAX2启动子区甲基化水

5、平，MassARRAY平台检测组织中PAX2启动子区甲基化水平并分析其与表达的关系；甲基化酶抑制剂处理内膜癌细胞探讨PAX2甲基化对表达的影响；TFsearch数据库预测与PAX2差异化甲基化片段结合的转录因子。结果：PAX2在子宫内膜癌组织上皮中的表达高于各类增生过长及正常内膜，在肿瘤组织间质中的表达低于正常内膜间质，PAX2表达与p53蛋白阳性相关；敲除PAX2后肿瘤细胞的增殖和侵袭能力受到抑制，但不影响细胞迁移能力；PAX2启动子区甲基化水平在子宫内膜癌组织和细胞株中均高于正常内膜组织和正常内膜腺上皮，

6、并与PAX2表达水平相一致；甲基化酶抑制剂下调PAX2启动子区甲基化水平可以抑制PAX2蛋白的表达；肿瘤中PAX2启动子区高甲基化可能通过Egr家族或c．Ets．1转录因子调控PAX2基因的表达。结论：PAX2参与子宫内膜癌细胞增殖与侵袭，可能通过启动子区高甲基化激活方式在子宫内膜癌中高表达。关键词：PAX2，子宫内膜癌，MassARRAY，启动子区高甲基化激活中图分类号：R737．334万方数据AbstractObjective：Toinvestigatetheexpression，methylationa

7、ndtheroleofPAX2incarcinogenesisofendometrialcancer,andthepossibleregulativemechanismofPAX2expresslon．Methods：TheexpressionofPAX2wasdetectedbyimmunohiStochemistrVinendometrialcancer,hyperplasiaandnormaltissues．Anditscorrelationwithclinicalpathologicalcharact

8、eristicswasanalyzed．Cellabilitiesofproliferation．invasionandmigrationweredetectedbyCCK一8，transwellandwoundhealingtestafterPAX2knockdownbysmallRNAinterference．BisulfitesequencingandMassARRAYwereusedtoqu