mir-187和mir-451在大肠癌中的表达及细胞功能研究

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2、人独立撰写，文责自负。研究生签名：赢博新肄悠岬目录中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．1英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．4研究论文miR-187*和miR-451在大肠癌中的表达及细胞功能研究前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．8日IJ吾⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．8材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．8结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．16附

3、图⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．18附表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．23讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．25结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．28参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．28综述microRNA．451在肿瘤中的研究进展⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一34致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯44个人简历⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

4、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一45中文摘要111iR-187*和miR-451在大肠癌中的表达及细胞功能研究摘要目的：美国全球癌症统计报告显示：结直肠癌在女性常见癌症中占第二位，在男性常见癌症中占第三位。结直肠癌是多种因素、多个基因相互作用逐步发展的结果，其确切机制仍未完全阐明。微小RNA(microRNA)在细胞分化、细胞周期及凋亡过程中发挥重要作用。它通过扩增、缺失、突变和后沉默等机制影响癌症的发生发展。本课题组，早期利用基因芯片技术对miRNAs进行筛查发现miR-187*及miR-451在结直肠癌组织中低表达。采用实时荧光定量聚合酶链反应(

5、real．timequantitativereversetranscription．PCR．RT-PCR)的方法检测miR-451结直肠癌组织标本及结直肠癌细胞株中的表达水平，并分析其临床意义。进一步应用平板克隆形成实验、MTT比色分析法以及流式细胞技术等方法检测miR-187*对结肠癌细胞增殖、凋亡、周期等过程的影响，阐明miR-187*在肿瘤发生发展过程中的生物功能，为深入了解结直肠癌发病机制提供理论依据。方法：1收集2011年5月～2012年5月40例来自河北医科大学第一医院、河北医科大学第四医院结直肠癌手术标本。每例标本分别取自结直肠原发肿

6、瘤组织及上(下)切缘正常黏膜且术后病理证实无癌组织侵犯的癌旁组织。新鲜标本离体后迅速置于液氮中，于．80。C保存。40名患者术前未接受任何化疗和放疗。2选取8种结肠癌细胞株Caco．2，DLDl，HCTl16，HT29，LOVO，SW480，SW620，SWlll6进行细胞培养。3应用RT-PCR方法检测8种结肠癌细胞株及结直肠正常黏膜组织中miR-187木和miR．451的表达水平，比较两组间及SW620和SW480两种细胞株间的表达水平是否存在统计学差异。4应用RT-PCR方法检测40例大肠癌组织及对应大肠正常黏膜组织中miR-187*和miR

7、-451的表达水平，比较两组间表达差异，分析miR-187*和miR-451的表达与大肠癌患者临床病理特征的关系。中文摘要5对HCTll6和SWlll6两种细胞进行miR-187*转染，将转染miR-187*模拟物组作为实验组，将转染无义寡核苷酸组作为对照组。6通过平板克隆形成实验观察细胞转染后HCTl16细胞和SWl16细胞集落形成情况，比较对照组和实验组间的差异。7HCTl16细胞和SWl116细胞中进行细胞转染后12h、24h、36h、48h、60h，分别应用MTT比色分析法检测5个时段的OD值，绘制细胞生长曲线，观察对照组和实验组间细胞增殖

8、改变情况。8应用流式细胞技术检测细胞转染后HCTl16细胞凋亡情况，比较对照组和实验组间的差异。9应用spssl3．0软件