微小rna在胸腺肿瘤组织的表达及其临床意义new

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1、广西医科大学学报２０１３Ｆｅｂ；３０（１）ＪＯＵＲＮＡＬＯＦＧＵＡＮＧＸＩＭＥＤＩＣＡＬＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹ·７９·微小ＲＮＡ在胸腺肿瘤组织的表达及其临床意义石俊杰冯旭１郑宝石王俊龙黄国雄王时俊（广西医科大学第一附属医院胸心外科南宁５３００２１）摘要目的：研究微小ＲＮＡ（ｍｉｃｒｏＲＮＡｓ，ｍｉＲＮＡｓ）在人类胸腺肿瘤组织中的表达及其作用。方法：收集广西医科大学第一临床医学院２０１０年９月至２０１２年３月切除的４５例胸腺肿瘤组织标本及肿瘤旁正常组织标本。通过ｍｉＲＮＡｓ微阵点杂交法检测肿瘤组织及其

2、癌旁正常组织的手术标本中ｍｉＲＮＡｓ的表达情况，对癌组织及其癌旁正常胸腺组织进行定性判断（癌和非癌）。结果：胸腺良性肿瘤和正常胸腺组织中对比发现有４种ｍｉＲＮＡｓ上调，分别为ｍｉＲ－１８３，ｍｉＲ－７ｅ－２，ｍｉＲ－２６ａ和ｍｉＲ２８（均Ｐ＜０．０５）；恶性胸腺肿瘤组织与正常胸腺组织相比，ｍｉＲ－２０５、ｍｉＲ－１８５、ｍｉＲ－２６ｂ、ｍｉＲ－２３ａ、ｍｉＲ－２２１、ｍｉＲ－１７－５ｆ、ｍｉＲ－２１４、ｍｉＲ－２２、ｍｉＲ－２１０和ｍｉＲ－１７表达明显上调（Ｐ＜０．０５）。结论：ｍｉＲＮＡｓ与胸腺

3、肿瘤的发生发展有密切的联系，有可能成为一个有效的肿瘤标志物用以对胸腺肿瘤的早期预测和诊断治疗。关键词微小ＲＮＡ；胸腺癌；肿瘤标记；微阵点中图分类号：Ｒ７３４．５文献标志码：Ａ文章编号：１００５－９３０Ｘ（２０１３）０１－００７９－０３胸腺癌是我国胸外科较为常见的肿瘤，占前纵隔肿瘤的后经病理诊断４２例为鳞状上皮细胞癌，３例为胸腺瘤。４２６％。胸腺癌是来源于胸腺上皮细胞的纵隔恶性肿瘤，在病例鳞状上皮细胞癌ＴＮＭ分期：Ｔ１２５例，Ｔ２１６例，Ｔ３１例。理组织学上表现出不同于胸腺瘤的恶性生物学行为。胸腺１

4、．２仪器与试剂：ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ扫描仪；ＱｕｎｔＡｒｒｙ软件癌的治疗以手术为主，但是术后容易复发，且肿瘤的恶性程（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒＩｎｃ，美国）；Ｔｒｉｚｏｌ试剂（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ，美国）；伊文度、浸润能力随着复发次数的增加往往也随之增强。近年蓝（ＢｉｏｔｉｕｍＩｎｃ，美国）；微阵点杂交芯片（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒＩｎｃ．，来，在小分子ＲＮＡ中新发现一类与调节基因表达密切相关Ｗｅｌｌｅｓｌｅｙ，ＭＡ）。的小分子非编码单链ＲＮＡ，称其为微小ＲＮＡ（ｍｉｃｒｏＲＮＡｓ，１．３组织总ＲＮ

5、Ａ提取：用Ｔｒｉｚｏｌ一步法提取组织中的总ｍｉＲＮＡｓ）。已经有研究表明ｍｉＲＮＡｓ与肿瘤有密切相关ＲＮＡ，通过异丙醇沉淀法浓缩ＲＮＡ，用分光度计定量，甲醛［１］。ｍｉＲＮＡｓ是近年生物医学领域新发现的一类非编码了变性胶电泳质检总ＲＮＡ质量。所有标本都是新鲜冰冻，临单链小分子ＲＮＡ，长度约２５个核苷酸，广泛存在于真核生物床病理资料齐全。低温环境下把上述标本在研钵中充分研［２］。ｍｉＲＮＡｓ能对基因表达进行负调控，进而调节细胞的中碎，用Ｔｒｉｚｏｌ提取总ＲＮＡ。紫外分光光度计检测ＲＮＡ纯代谢、增殖、

6、分化和凋亡等基本的生理过程。目前研究表明，度，测总ＲＮＡ的Ａ２６０／２８０为１．８～２．０。ｍｉＲＮＡｓ在基因表达调控领域非常重要，其涉及的生命活动１．４ＭｉＲＮＡｓ微阵点杂交法：所有肿瘤标本切除后立即冷包括生物个体发育、组织分化、病毒感染、癌症发生发展的各冻放置，根据试剂商提供的说明，总ＲＮＡ的提取根据制造商［３］。但ｍｉＲＮＡｓ在胸腺癌发生过程中扮演的角色仍个方面的要求采用Ｔｒｉｚｏｌ法（ＧＩＢＣＯ，Ｒｏｃｋｖｉｌｌｅ，ＭＤ）。ＭｉＲＮＡｓ的不十分清楚。在本实验研究中，我们分析了ｍｉＲＮＡｓ在

7、人类寡核苷酸微芯片载有３６８探针，相当于２４８ＭｉＲＮＡｓ和１５个胸腺癌的表达，并检测不同的ｍｉＲＮＡｓ出现在胸腺癌组织中ｔＲＮＡ，对两种探针进行了不同的设计，包括活动序列和其他的分子生物学特征。特殊的前提物质。使用这些独特的序列，我们可以针对性的分析ＭｉＲＮＡｓ和ｐｒｉ－ｍｉＲＮＡｓ在同一基因的转录和表达以及１材料与方法各种ＭｉＲＮＡｓ分子表达水平的高低。而每个点的信号强度是从总强度中减去背景强度。１．１材料：标本取自２０１０年９月至２０１２年３月在广西医科大学第一临床医院胸心外科接受手术治疗的

8、胸腺肿瘤患者１．５数据统计学的分析：原始数据进行标准化分析使用４５例，其中男２８例，女１７例，年龄１２～５５岁，中位年龄ＧｅｎｅＳｐｒｉｎｇ软件，ＧｅｎｅＳｐｒｉｎｇ分析过程中，每个ＭｉＲＮＡｓ均产生３个点数据和１个平均值，组间比较采用方差分析，Ｐ４２岁。手术切除标本立刻放于－８０℃的冰箱冻存。取患者的胸腺肿瘤及肿瘤旁正常胸腺组织标本进行研究。研究方＜０．０５为差异有统计学意义。案均经广西医科大学第一附属医院伦理委员会批准，患者本２结果人或法定代理人同意并签订知情同意书。４５例胸腺