卵巢恶性肿瘤组织中微小rna的检测及其临床意义

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1、卵巢恶性肿瘤组织中微小RNA的检测及其临床意义杨群芳严伟玲【摘要】目的探讨miR-10a、miR-93和miR-200a在卵巢恶性肿瘤组织中的表达及其临床意义。方法采用实时定量PCR仪检测40例正常卵巢组织、40例卵巢良性囊肿组织和40例卵巢恶性肿瘤组织中miR-10a、miR-93和miR-200a表达情况，miR在不同组织中表达的比较采用方差分析，t检验分析miR与卵巢恶性肿瘤临床病理特征的关系，预后分析采用Kaplan-Meier法log-rank检验和Cox比例风险回归模型。结果miR-10a在卵巢恶性肿瘤组织中的表达显著高于正常卵巢组织和卵巢良性囊肿组

2、织（p<0.001），miR-93和miR-200a在三组织中的表达差异均无统计学意义（p>0.05）；miR-10a表达量在有大网膜转移、淋巴结转移和远处器官转移的卵巢恶性肿瘤组织中显著高于无转移者（p<0.05）。卵巢恶性肿瘤组织miR-10a高表达的患者比低表达的患者中位生存时间更短，差异具有统计学意义（p=0.01）；Cox模型多因素分析显示，miR-10a表达量是影响患者生存预后的独立因素（p=0.002）。结论miR-10a表达与卵巢癌转移有关，是影响卵巢癌预后的主要因素，可以作为判断卵巢癌预后的标志物。【关键词】卵巢恶性肿瘤miR

3、-10a转移预后doi:10.3969/j.issn.1671-332X.2014.07.030卵巢恶性肿瘤是女性生殖器官常见的恶性肿瘤之一，其发病隐匿，死亡率高居女性恶性肿瘤第四位，并有逐年上升的趋势。因此提高卵巢癌患者早期诊断以及改善其预后水平非常重要［1］。微小RNA（micro-RNA，miRNA）是一类高度保守的非编码小分子单链RNA，其通过调节信使RNA表达活性在转录水平调控靶基因的表达，从而参与细胞生长、发育、分化和增殖等多个生命过程［2-3］。有研究表明miR-10a、miR-93和miR-200a通过影响其靶基因的表达，从而参与肿瘤的发生、发展

4、和预后［4-6］。miR-10a、miR-93和miR-200a在肿瘤组织中存在异常表达的情况，同时有研究证实miR-10a的表达与肿瘤的转移有密切关系［7］。本研究探讨miR-10a、miR-93和miR-200a在卵巢恶性肿瘤组织中的表达及其与卵巢癌临床病理参数及预后的关系，确认其能否作为判断卵巢癌预后的标志物。1对象与方法1.1研究对象选择某医院妇产科2007年6月~2012年12月行卵巢手术治疗的患者，患者切除的卵巢组织均经过严格的病理学检查确诊。其中正常卵巢组织40例，年龄26~58岁，平均42.8岁，均为子宫肌瘤病人行卵巢切除术，病理检查无异常。卵巢

5、良性肿瘤40例，年龄21~63岁，平均43.5岁，包括卵巢黏液性瘤14例，卵巢浆液性瘤22例，畸胎瘤6例。卵巢恶性肿瘤40例，均为有完整随访资料的原发性卵巢癌患者，年龄35~72岁，平均44.3岁；按照世界卫生组织（UniversalRTmicroRNAPCR）10ul、PCR混合液2ul共20ul在实时荧光定量PCR仪（ABI7500）进行扩增，反应条件为：94℃预变性5min，94℃变性30s,56℃延伸30s，72℃退火45s，以上相同条件循环40次。每例标本进行复孔检测两次，记录每个反应管中的荧光信号到达所设定的阈值时所经历的循环数为Ct值，两次检测的C

6、t值取平均值作为每例样本的最终Ct值，同时以U6snRNA作为内参其检测Ct值，目标mRNA表达量=2-△Ct，其中△Ct=CtmiR-CtU6。1.4统计学方法本文所有的统计分析均采用SPSS21.0统计软件进行。对样本miR表达量等定量资料采用正态性检验，资料为正态分布，故使用均数±标准差表示，三组样本间miR表达量的比较采用方差分析LSD法两两比较；两组样本间miR表达量比较采用t检验；采用Kaplan-Meier法进行生存分析并绘制生存曲线，生存曲线两组间比较采用log-rank检验；采用Cox比例风险回归模型进行生存资料的多因素分析。所有检验均为双侧检

7、验，p<0.05为差异具有统计学意义。2结果2.1miR-10a、miR-93和miR-200a在正常卵巢组织、卵巢良性囊肿组织和卵巢恶性肿瘤组织中的表达miR-10a在卵巢恶性肿瘤组织中的表达量高于正常卵巢组织和卵巢良性囊肿组织中的表达量，差异均具有统计学意义（p<0.001）；miR-10a在正常卵巢组织和卵巢良性组织中的表达量差异无统计学意义（p>0.05）；miR-93和miR-200a在正常卵巢组织、卵巢良性囊肿组织和卵巢恶性肿瘤组织中的表达量差异均无统计学意义（p>0.05）,见表1。2.2卵巢恶性肿瘤组织中的miR-10a、

8、miR-93和miR-2