单次灌胃杂色曲霉素对小鼠大脑细胞的影响

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1、中国药理学与毒理学杂志２００４年２月；１８（１）：５７－６１ＣｈｉｎＪＰｈａｒｍａｃｏｌＴｏｘｉｃｏｌ２００４Ｆｅｂ；１８（１）：５７－６１·５７·单次灌胃杂色曲霉素对小鼠大脑细胞的影响刘晋红，张祥宏，左连富，严霞，王俊灵，黄向华，邢凌霄，李月红，王凤荣（河北医科大学实验病理室，河北石家庄０５００１７）摘要：目的探讨单次ｉｇ杂色曲霉素（ＳＴ）对小鼠大动物实验过程中发现ＳＴ处理组小鼠有神经系统功脑细胞的影响。方法采用形态学观察和流式细胞能障碍表现，但有关ＳＴ对脑组织生物学效应的研究术定量检测方法，研究ＳＴ对ＢＡＬＢ／ｃ小

2、鼠大脑神经国内外均未见报道。本研究用形态学观察和流式细细胞的影响。结果病理形态学观察可见，ｉｇ小剂胞技术定量检测相结合的方法，分析ＳＴ对小鼠大脑量ＳＴ（３·ｋｇ－１）后１２ｈ或大剂量ＳＴ（３ｍｇ·ｋｇ－１）后神经细胞的影响，以期探讨ＳＴ对小鼠脑组织的生μｇ６ｈ即可见小鼠大脑皮质、丘脑、海马ＣＡ２区神经元物学效应，进而对ＳＴ暴露对机体的危险性做出评出现胞核固缩深染、胞浆嗜酸性变、空泡变性等病理估。变化，且随剂量增大和作用时间延长，病变神经元逐渐增多；光镜下对海马ＣＡ２区病变神经元进行计数１材料与方法分析，结果表明ＳＴ处理组

3、发生病理变化的神经元比例均高于相应对照组，且呈剂量和时间依赖性增高；１．１动物分组及处理流式细胞术定量检测结果表明，ｉｇＳＴ３，３０，３００和ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，１８～２０ｇ，雌雄各半，清洁级，合３０００μｇ·ｋｇ－１１２ｈ后，小鼠脑细胞的凋亡率呈剂量格证号冀医动管字号第０４０８２号，由河北医科大学依赖性增高；ｉｇ３ｍｇ·ｋｇ－１的ＳＴ后６～４８ｈ，随ＳＴ作实验动物学部提供。ＳＴ购自美国Ｓｉｇｍａ公司，溶于用时间的延长，脑细胞凋亡率也明显增高。结论生理盐水。实验分两部分进行：经口给予ＳＴ可导致小鼠大脑皮质、丘脑、海马ＣＡ２

4、实验Ⅰ：将３０只ＢＡＬＢ／ｃ小鼠随机分为５组，分别ｉｇＳＴ０，３，３０，３００和３０００·ｋｇ－１，给药容量为２５区神经元发生退行性病变，诱导并促进小鼠大脑细μｇ－１。ｉｇ１２ｈ后将小鼠脱颈处死，迅速取脑，留胞凋亡。ｍＬ·ｋｇ关键词：杂色曲霉素；脑；凋亡；流式细胞术视交叉后缘至大脑脚前缘部分，从大脑纵裂处平均分为两部分，分别用１０％甲醛缓冲液和７０％乙醇固中图分类号：Ｒ９９６．１定，待进行形态学观察和流式细胞术检测。文献标识码：Ａ实验Ⅱ：将４８只ＢＡＬＢ／ｃ小鼠随机分为ＳＴ处理文章编号：１０００３００２（２００４）０１

5、００５７０５组和对照组，每组２４只，雌雄各半。分别ｉｇＳＴ３－１和等量生理盐水。两组小鼠分别于ｉｇ后６，ｍｇ·ｋｇ杂色曲霉素（ｓｔｅｒｉｇｍａｔｏｃｙｓｔｉｎ，ＳＴ）是杂色曲霉１２，２４和４８ｈ各取６只小鼠（雌雄各３只）脱颈处（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓｖｅｒｓｉｃｏｌｏｒ）、构巢曲霉（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓｎｉｄｕｌａｎｓ）死，立即取脑，待测（同实验Ⅰ）。等真菌产生的毒性代谢产物［１］，该菌及其产物极易１．２形态学观察污染粮食、油类及各种食品，对动物和人类有明显的常规固定、脱水、透明和石蜡包埋，连续冠状切致癌性和致突变

6、性［２～５］。本研究室在进行长期诱癌片，片厚４，普通ＨＥ染色，光镜观察小鼠脑组织μｍ神经元的病理形态学变化，并对海马ＣＡ２区神经元收稿日期：２００３０１２２接受日期：２００３０４３０变性情况进行了计数分析。作者简介：刘晋红（１９７７－），女，河北省石家庄市人，在１．３流式细胞术定量检测读医学硕士研究生，主要从事肿瘤病因与肿瘤病理研究；张按左连富等［６］方法制备单细胞悬液并进行细胞祥宏（１９５７－），男，河北省巨鹿人，教授，博士生导师，主要从事肿瘤病因与肿瘤病理研究。ＤＮＡ染色。主要步骤如下：将组织块在２００目的铜

7、－１联系作者Ｅｍａｉｌ：ｚｈａｎｇｘｈ＠ｈｅｂｍｕ．ｅｄｕ．ｃｎＴｅｌ：网上搓，并用磷酸缓冲盐溶液（ＰＢＳ，０．０１ｍｏｌ·Ｌ，（０３１１）６２６６３２１Ｆａｘ：（０３１１）６０４３０２６ｐＨ７．４）向下冲洗细胞入试管内，离心收集细胞，经中国药理学与毒理学杂志２００４年２月；１８（１）·５９·Ｔａｂ２．ＴｈｅｐｅｒｃｅｎｔａｇｅｏｆｄｅｇｅｎｅｒａｔｅｄｎｅｕｒｏｎｓｉｎＴａｂ３．ＥｆｆｅｃｔｏｆｓｔｅｒｉｇｍａｔｏｃｙｓｔｉｎａｔｄｉｆｆｅｒｅｎｔｈｉｐｐｏｃａｍｐａｌＣＡ２ｒｅｇｉｏｎｏｆｍｉｃｅａｆｔｅｒｓｔｅ

8、ｒｉｇｍａｔｏｄｏｓａｇｅｓｏｎａｐｏｐｔｏｓｉｓｏｆｃｅｒｅｂｒａｌｃｅｌｌｓｉｎｍｉｃｅｃｙｓｔｉｎｔｒｅａｔｍｅｎｔａｔｄｉｆｆｅｒｅｎｔｔｉｍｅＳＴ／μｇ·ｋｇ－１Ａｐｏｐｔｏｓｉｓｒａｔｅ／％ＴｉｍｅａｆｔｅｒＳＴＤｅｇｅｎｅｒａｔｅｄｎｅｕｒｏｎ／％０３．２±０．９／ｈＣｏｎｔｒｏｌＳＴ（３ｍｇ·ｋｇ－