马铃薯抗病毒、类病毒转基因研究

马铃薯抗病毒、类病毒转基因研究

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1、山西大学2013届硕士学位论文马铃薯抗病毒、类病毒转基因研究作者姓名闫建俊指导教师白云凤研究员学科专业作物遗传育种研究方向植物分子生物学和基因工程培养单位生物工程学院学习年限2010年9月至2013年6月二O一三年六月ThesisforMaster’Sdegree,ShanxiUniversity,2013StudyontransgenicpotatoresistanttoPLRVandPSTVdStudentNameJian-junYanSupervisorProf.Yun—fengBaiMajorSp

2、ecialtyCropgeneticbreedingPlantmolecularbiologyandgeneticengineeringDepartmentInstituteofBio-engineeringResearchDuration2010.09.2013.06June,2013⋯盘面目录荆愀中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯三.=三::羔:::::.:⋯..I2.2.6再生植株的Northernblot分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯202.2.7PSTVd病毒RT-PCR检测⋯⋯

3、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯23第三章结果与分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯:..⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.263.1植物双价表达载体p3301.DR.Isir的酶切鉴定⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯263.2马铃薯遗传转化体系的优化⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯263.2.1不同外植体愈伤组织诱导及分化情况⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..263.2.2不同预培养时间对转化效率的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..273.2.3热激处理⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..273.2.4共培养时间对后期抑菌

4、的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..283.3马铃薯再生植株的PCR检测⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯293.3.1抗PSTVd双价核酶基因检测⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.293.3.2抗PLfWIS序列检测⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.293.4转基因马铃薯的Northernblot分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯303.5RT-PCR检测⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯30第四章讨论与结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯324.1根癌农杆菌介

5、导的马铃薯遗传转化体系的优化⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯324.2再生植株的分子检测⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯324.3进一步研究计划⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯32参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.:⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯34缩略词⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.40攻读学位期间取得的研究成果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.41致{射⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯42个人简况及联系方

6、式⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.43承诺书⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.44学位论文使用授权声明⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.45ContentsChinseAbstract..⋯..⋯.⋯⋯.⋯⋯.⋯.⋯⋯..⋯⋯.⋯⋯.⋯..⋯.⋯.⋯..⋯..⋯.⋯⋯⋯.⋯⋯..⋯⋯⋯⋯.IABSTRACT⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.IIIChapter1Literature⋯⋯.⋯⋯.⋯.⋯..⋯..

7、⋯⋯.⋯⋯..⋯.⋯.⋯.⋯..⋯⋯.⋯.⋯.⋯⋯.⋯..⋯.⋯..⋯l1.1PresentsituationofPotatoproductionandmajorviraldiseases⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.11.2Researchintroductiononpotatoantivirus⋯.⋯.⋯.⋯..⋯⋯.⋯⋯⋯⋯.⋯.⋯..⋯.⋯...11.2.1TheadvanceofpotatoresistantPLRV⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.21.2.2Researchintroductiononr

8、esistancePSTVdofpotato⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯51.3PlanttransformationbyAgrobacterium-mediated⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..61.3.1ThemechanismandprocessofAgrobacterium—mediated⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.61.3.2TnemaininfluencefactorsonpotatobyAgrobacterium—mediated

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