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《糖尿病小鼠血糖波动模型的建立及其对脏器损伤的研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。
1、第47卷第5期复旦学报(自然科学版)Vol.47No.52008年10月JournalofFudanUniversity(NaturalScience)Oct.2008文章编号:042727104(2008)0520647205糖尿病小鼠血糖波动模型的建立及其对脏器损伤的研究涂白青,翁宇静,童智,叶希韵(华东师范大学生命科学学院,上海200062)摘要:通过建立糖尿病小鼠的血糖波动模型,研究血糖波动对糖尿病小鼠各脏器氧化损伤以及对糖尿病并发症相关实验指标的影响.将实验小鼠分为四组,正常组小鼠、正常小鼠血糖波动组、糖尿病小鼠组、糖尿病小
2、鼠血糖波动组.首先通过尾静脉注射四氧嘧啶5mg/kg体重建立小鼠糖尿病模型,正常波动组和糖尿病波动组每天3次腹腔注射葡萄糖2g/kg体重以造成小鼠的血糖波动,其余两组腹腔注射生理盐水,各组小鼠均自由进食进水.实验6周后采血,检测血清中血糖、果糖胺含量以及各脏器中丙二醛、谷胱甘肽、山梨醇等的含量.糖尿病波动组小鼠的血糖、果糖胺水平、各脏器的氧化损伤程度和山梨醇含量都显著高于糖尿病组(P<0.01).说明血糖波动能加重糖尿病小鼠的病情,并对脏器造成更为严重的损伤,这有可能是导致糖尿病并发症发生的原因之一.关键词:血糖波动;糖尿病小鼠;糖尿
3、病并发症;氧化损伤;模型建立中图分类号:R587.1文献标识码:A高血糖是糖尿病的标志以及导致慢性并发症的主要原因,高血糖的不良作用主要是以慢性持续高血[1][2]糖和血糖水平波动两种方式体现的.近年来有研究报道,糖尿病的预后及慢性并发症的发生和发展不仅与整体血糖水平的升高密切相关,而且与患者的血糖波动有密切关系.糖尿病患者血糖波动越大,慢[3]性并发症的发生率越高、预后就越差.临床研究显示,长期的血糖波动比慢性持续高血糖对人体的危害[428]更加严重.体外细胞培养研究还发现,间歇性葡萄糖浓度波动会导致肾小球系膜细胞,血管内皮细胞等发
4、生不同程度的损伤.由于糖尿病病人一天中的血糖浓度是呈锯齿形不断变化的,餐后血糖水平快速升高是糖尿病病人典型的、常见的临床症状.本文通过模拟餐后高血糖引起糖尿病患者血糖波动的情形,建立了糖尿病小鼠的血糖波动模型,初步研究了血糖波动对糖尿病小鼠肾脏、肝脏、心脏的氧化损伤情况,以及对血糖、果糖胺、山梨醇含量的影响,旨在通过动物实验进一步探讨血糖波动对糖尿病小鼠造成的危害,以及血糖波动与糖尿病并发症之间的关系,为今后深入的机制研究打下一定的实验基础并提供了可操作的实验动物模型.1材料与方法1.1药品与试剂+葡萄糖(GLU)购自上海化学试剂公司
5、;四氧嘧啶(Alloxan)购自Sigma;辅酶Ñ(NAD)购自上海鼎国生物科技有限公司;葡萄糖氧化酶法测定试剂盒和果糖胺试剂盒购自上海科欣生物技术研究所;丙二醛(MDA)试剂盒和谷胱甘肽(GSH)试剂盒购自南京建成生物工程研究所.其他化学药品均为国产分析纯.1.2实验动物雄性昆明小鼠,体重在25~30g,中科院上海斯莱克实验动物有限公司,许可证号:SCXK(沪)200320003.收稿日期:2008201221作者简介:涂白青(1982)),男,硕士研究生;通讯联系人叶希韵,女,副教授,E2mail:xyye@bio.ecnu.ed
6、u.cn.648复旦学报(自然科学版)第47卷1.3糖尿病小鼠模型的建立方法从60只雄性昆明小鼠中随机各取出8只作为正常组和正常波动组.其余所有小鼠禁食12h后,尾静脉注射以0.9%的生理盐水配制的5mg/mL四氧嘧啶溶液,注射量为50mg/kg体重,5d后,禁食6h取小鼠尾静脉血用葡萄糖氧化酶法测定试剂盒测血糖值.选取血糖值介于16~20mmol/L的小鼠16只作为糖尿病组和糖尿病波动组.1.4实验分组正常组(N)、正常波动组(F)、糖尿病组(M)、糖尿病波动组(M+F),每组各8只小鼠.1.5小鼠血糖波动模型的建立方法取正常小鼠和
7、已成糖尿病模型的小鼠各8只,每天3次腹腔注射葡萄糖2g/kg体重,每只小鼠每次注射0.5mL,第一次注射时间为每天早上的8:00,第二次注射时间为每天中午12:00,第三次注射时间为每天下午16:00.另外取正常小鼠和已成模型的糖尿病小鼠各8只,按照以上时间和方法腹腔注射0.9%的生理盐水0.5mL.每周进行1次全天7个时间点的血糖检测,以检查波动的规律性.连续注射6周后,采血,并将各组小鼠脏器(肾脏,肝脏,心脏)及眼球组织制成匀浆液备用.1.6检测指标血糖、果糖胺、丙二醛、谷胱甘肽、山梨醇、肝糖原均按试剂盒的方法检测.1.7统计学处
8、理)实验数据均以平均数?标准差(X?SD)表示,组间差异比较采用t检验.以上统计用Excel软件分析.2结果与分析2.1实验各组小鼠第六周全天血糖波动的变化通过对正常小鼠和糖尿病小鼠一日3次灌胃和腹腔注射葡萄糖来实现小鼠
