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1、第26卷第2期水生生物学报Vol.26,No.22002年3月ACTAHYDROBIOLOGICASINICAMar.,2002鲢早期发育阶段鱼体脂肪酸组成变化朱邦科曹文宣(中国科学院水生生物研究所,武汉430072)摘要:用气相色谱仪分析了鲢受精卵和仔鱼的脂肪酸组成及其变化。受精卵中共检测到19种脂肪酸;SFA含量最高,其次为PUFA,MUFA最少。SFA中以16C∶0为主,MUFA中以18C∶1为主,PUFA中以DHA、AA和EPA为主;n-3/n-6为2.45。初孵仔鱼中HUFA因卵膜的脱落而减少,以后逐渐积累;鲢仔鱼具有将18CPUFA转化为长链
2、HUFA的能力;在早期发育阶段,鲢仔鱼主要消耗16C∶0作为能量代谢的基质。关键词:鲢;受精卵;仔鱼;脂肪酸组成中图分类号:S965.113文献标识码:A文章编号:1000-3207(2002)02-0130-006鱼类脂肪酸研究已有近八十年历史,国外在鱼体脂肪酸组成、鱼类的脂肪营养以及鱼[1—3]类脂肪酸对人类健康的作用等方面做了大量研究。八十年代后国内一些学者开始进[4—7]行鱼类脂肪酸研究。在鱼类的胚胎发育和胚后发育阶段,脂肪是重要的代谢能源。仔鱼孵出后,卵黄囊中的内源性营养很快被消耗。饥饿时,仔鱼的脂肪迅速减少,同时干重下[8—10]降(如川鲽、
3、大西洋鲱、金头鲷、建鲤等)。已证明有些种类的仔鱼在饥饿期有选择地[9,11]消耗脂肪酸。饥饿的金头鲷鱼苗中脂肪酸的损失遵循以下顺序:(n-6)>(n-9)>(n-[9][12]3)。根据鱼体脂类组成和脂肪酸组成,可评价鱼苗和幼鱼的营养状况。因此,研究鱼类早期发育阶段脂肪酸组成的变化和饥饿对其影响,对评价鱼苗的营养状况并进一步预测鱼苗的早期资源有重要的参考价值,也可为养殖鱼类仔鱼开口饵料的配制提供参考。1材料与方法1.1试验材料试验材料取自华中农业大学水产站人工催产的鲢受精卵和同一批卵所孵化的鱼苗。仔鱼平游后(孵出第4d)运回实验室饲养:饥饿组饲养于2个直
4、径24cm圆形玻璃缸,每缸约1000尾。试验用水为曝气一昼夜的自来水。每天中午用虹吸管排污后换水一半。试验期间水温21—25.5℃(自然水温,上午9时测量)。每组设一个平行试验。收稿日期:2000-07-20;修订日期:2000-12-20基金项目:国务院三峡办和中国长江三峡工程开发总公司项目资助[SX(98)-15/KHB/JS];农业部淡水水产增养殖生物学重点开放实验室资助作者简介:朱邦科(1964—),男,浙江宁海人;博士,副教授;从事鱼类生态学和水产养殖教学与科研,现工作单位在华中农业大学水产学院(武汉430070),华中农业大学水产试验站提供实
5、验材料,华中农业大学水产学院99届毕业生刘全义参加了部分分析工作,谨此一并致谢2期朱邦科等:鲢早期发育阶段鱼体脂肪酸组成变化131每天下午取样,每次0.2—0.4g(约100尾)。样品用滤纸吸去水分后用十万分之一电子天平称重,保存在低温冰箱(-35℃)至分析。[13]1.2脂肪酸甲脂的制备氯仿-甲醇法提取脂质。样品研磨后加氯仿和甲醇各2mL,转入试管;再各用2mL冲洗研钵,并入试管;加3.5mL蒸馏水,摇匀,过滤。滤液转入50mL离心管;滤纸和滤器用氯仿(1mL)淋洗两次,淋洗液并入离心管,3500r/min离心5min,分层后吸取下层氯仿(含全部脂肪)
6、;残液中加氯仿3mL搅拌,再离心后吸取氯仿层,并入提取液。提取液经真空干燥,2mL氯仿再溶,1mL氯仿淋洗,转移到称重后的试管,真空干燥后称重,减量法求脂肪重。脂质用2mL氯仿溶解,转入10mL具盖刻度试管;0.5mL氯仿淋洗两次并入试管,加5mL0.5mol/LNaOH甲醇溶液,混匀,充氮气,盖紧管盖,置80℃水浴2h。冷却后加14%三氟化硼甲醇溶液3.5mL,充氮气,80℃水浴2h转甲脂。1mL正己烷萃取,吸取上层正己烷;0.5mL正己烷再萃取两次,萃取液合并,置真空干燥箱中干燥。最后将脂肪酸甲酯用0.5mL正己烷溶解,供色谱分析用。1.3脂肪酸分析
7、条件岛津GC-9A型气相色谱仪,配备有C-R3A型数据微处理器;层析柱:胶联弹性石英毛细管柱(30m×0.25mm,中国科学院大连化学物理研究所一室提供);载气:N2;燃气:H2;柱温:225℃,采用程序升温,180℃保持3min,9℃/min,升温到225℃,保留30min;进样口温度:250℃。色谱峰的定性采用部分脂肪酸甲酯标准样(Sig-ma公司)与当量链长值相结合的方法进行。分析结果经岛津C-R3A型处理器输出,脂肪酸的百分含量用面积归一化的方法给出(以峰值面积的百分比表示)。2结果与讨论2.1受精卵的脂肪酸组成鲢受精卵中共检测到19种脂肪酸(表
8、1),饱和脂肪酸(SFA)、单不饱和脂肪酸(MU-FA)和多不饱和脂肪酸(PUF
