钙结合蛋白s100a9在小鼠铜绿假单胞菌肺炎中的表达及意义

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1、中图分类号：563.9硕士学位论文钙结合蛋白S100A9在小鼠铜绿假单胞菌肺炎中的表达及意义院（系）、所临床医学院研究生姓名毛安强学科、专业内科学导师姓名湛晓勤教授二Ο一三年四月1目录1钙结合蛋白S100A9在小鼠铜绿假单胞菌肺炎中的表达及意义…………………………………………………………...…....11.1中文摘要…………………………………………………….......31.2英文摘要……………………………………………………...…51.3前言…………………………………………………………...…71.4材料与方法………………………………………………….…111.5结果……

2、…………………………………………………….…171.6讨论………………………………………………………….…251.7结论………………………………………………………….…301.8参考文献…………………………………………………….…311.9英汉缩略词对照表………………………………………….…342致谢………………………………………………………….…353综述…………………………………………………………….362钙结合蛋白S100A9在小鼠铜绿假单胞菌肺炎中的表达及意义摘要目的：观察小鼠铜绿假单胞菌肺炎肺组织中钙结合蛋白S100A9mRNA表达，并同时测定对应小鼠血液中S10

3、0A9钙结合蛋白含量，观察肺组织的病理改变，探讨钙结合蛋白S100A9在铜绿假单胞菌所致小鼠肺部感染中的地位与作用。方法：小鼠36只，按随机数字表分为空白对照组12只、模型组小鼠24只。通过经环荚膜穿刺注射铜绿假单胞菌菌液建立肺部感染模型。空白对照组（经环荚膜8注射等量的2个麦氏单位浓度（6×10cfu/ml）0.6ml的铜绿假单胞菌菌液，造模过程中死亡2只）、模型组（经环荚膜注射等量的2个麦氏单位浓度的铜绿假单胞菌菌液0.6ml，造模中死亡5只,分别在在3小时和9小时2个时间点各处死9和10只）。取小鼠右肺下叶HE染色观察肺组织病理，观察空白对照组，3h模型组及9h模型组

4、的病理改变；使用普通PCR检测系统对三组小鼠肺组织中S100A9mRNAPCR反应进程中的产量进行实时监测,最终对实验数据进行分析,从而比较三组小鼠S100A9mRNA表达，并同步采用双抗体夹心酶联免疫吸附测定(ELISA)法分别测定三组小鼠血液中S100A9以及TNF-a的含量，比较三组小鼠血液中生成S100A9钙结合蛋白的差异及与TNF-a变化的相关系。结果：（1）病理观察：大鼠右下肺肺组织HE染色200倍光镜下病理结果显示，正常对照组（1组）肺泡结构较为均匀与清晰，有少许淋巴细胞与巨噬细胞侵润；模型组（3h组）主要为肺泡炎性改变，肺泡内及周围可见渗出，中性粒细胞和淋3

5、巴细胞，巨噬细胞浸润;模型组（9h组）肺泡炎性最严重，肺泡内及周围可见大量渗出，大量中性粒细胞和淋巴细胞，巨噬细胞浸润，病理炎性改变明显重于3h组。（2）普通PCR实验:本实验根据电泳后条带亮度的强弱来判断模板拷贝数的高低，或者是表达量的高低。实验结果得出s100A9mRNA在第3h，9h组中的条带亮度强度明显高于空白组，提示S100A9表达量模型组明显高于对照组,且经统计分析后3h与对照组差异具有统计学意义（p<0.05)，与9h模型组比较（P<0.05）差异有意义。（3）S100A9钙结合蛋白ELISA检测：结果显示3h，9h组外周血中S100A9的含量明显高于空白组，

6、且以3h组增高最明显，3h组与空白组比较差异具有统计学意义（p<0.05）与9h组比较（P<0.05）有差异。（4）肿瘤坏死因子TNF-a的ELISA检测结果显示：3h，9h组外周血中TNF-a的含量明显高于空白组，差异具有统计学意义（p<0.05）。（5）通过对S100A9钙结合蛋白与肿瘤坏死因子-a的相关性分析后，得出两者之间的变化趋势存在正相关，3h模型组r=0.77；9h模型组，r=0.653.结论：（1）.钙结合蛋白S100A9参与小鼠铜绿假单胞菌肺部炎症反应。（2）.钙结合蛋白S100A9在小鼠铜绿假单胞菌肺炎中与经典炎性因子TNF-a存在密切相关。关键词：S1

7、00A9钙结合蛋白；S100A9mRNA；肿瘤坏死因子-a（TNF-a）;铜绿假单胞菌肺炎；4CalciumbindingproteinexpressionandsignificanceofS100A9inlungtissueinmiceinfectedbyPseudomonasaeruginosaAbstractObjective:thepathologicalchangesoflungtissueinmicewithPseudomonasaeruginosapneumoniainfectionsobserved