醋制南五味子降酶保肝作用机理研究

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1、学院代号10716学号010051540192专业代码100800密级陕西中医学院ShaanxiUniversityofChineseMedicine硕士学位论文醋制南五味子降酶保肝作用机理研究学位申请人张萌专业名称中药学申请学位类型医学硕士科学学位指导教师赵海峰论文提交日期2013年4月陕西中医学院学位论文独创性声明及使用授权声明学位论文独创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是个人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果，无抄袭及编造行为。除文中已经特别加以注明引用的内容外，本论文不含任何其他个人或集体已经发表或撰

2、写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明并致谢。本人完全意识到本声明的法律结果并由本人所承担的法律责任。学位论文作者签名＿＿＿＿＿日期：年月日关于学位论文使用授权的声明陕西中医学院有权保留使用本人学位论文，同意学院按规定向国家有关部门机构送交论文的复印件和电子版，允许被查阅和借阅。本人授权陕西中医学院可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或其他复印手段保存和汇编本学位论文。可以公布（包括刊登）论文的全部或部分内容。（保密论文在解密后应遵守此规定）论文作

3、者签名＿＿＿＿＿日期：年月日论文导师签名＿＿＿＿＿日期：年月日摘要目的：从醋制入肝的角度，结合现代科研技术探讨醋制南五味子降酶保肝作用机理的研究。方法：1.利用高效液相色谱法（色谱条件——流动相是甲醇(A)-水(B)；梯度洗脱；-1流速为0.8mL·min；检测波长为230nm），通过对醋制前后南五味子组分研究，探讨醋制前后木脂素类化合物含量变化及“醋制入肝”的炮制原理。2.利用CCl4致大鼠急性肝损伤实验，通过醋制前后南五味子对大鼠体内生化指标（AST、ALT、GSH-Px、MDA及SOD）的影响，探讨醋制南五味子降酶保肝

4、的药效学评价及药效动力学研究。3.通过免疫组化方法，对醋制前后的南五味子进行定位、定性及定量的研究。4.利用信号通路（Nrf2、NF-κB、HIF-1α和Cox-2）的表达及肝脏和血浆中内源代谢物的检测作为评价指标，考察醋制南五味子对急性肝损伤氧化应激及炎症状态的调节能力。结果：1.高效液相色谱法测得的数据及图谱显示醋制后南五味子木脂素类化学成分高于醋制前。2.醋制前后南五味子对大鼠体内生化指标的数据表明醋制南五味子能够降低血清中ALT和AST的含量，提高肝组织中SOD活性和GSH含量，降低MDA含量，明显改善肝组织损伤程度

5、。3.免疫组织化学染色结果显示，醋制五味子预处理对大鼠肝组织HIF-1α蛋白表达具有调节作用，并且其调节能力优于南五味子生品。4.醋制五味子对CCl4致急性肝损伤大鼠肝组织NF-κB免疫组化结果表明醋制南五味子对大鼠损伤肝组织的NF-κB的蛋白表达具有调节作用，并且其调节能力强于南五味子生品。5.醋制前后给药组Cox-2mRNA表达与模型组进行比较，其表达值均减小。醋制前后给药组Nrf2mRNA表达与模型组进行比较，其表达值均减小。6.9种靶标内源代谢成分在CCl4诱导的急性肝损伤大鼠模型中相对于空白对照组而言，在血浆和肝脏

6、中浓度都具有显著性波动。结论：本实验从醋制前后南五味子的化学组分、动物组织的生化指标、免疫组化、信号通路及内源代谢物五个方面解释了醋制南五味子增强了降酶保肝的能力，其作用机理主要是醋制南五味子相对于生品而言增强抗炎症和抗氧化应激作用。关键词：醋制南五味降酶保肝指纹图谱信号通路代谢组学StudyingtheMechanismofReducingEnzymeHepatoprotectiveEffectoftheVinegarKadsuraAbstractObjective:Fromthepointofviewofthevineg

7、arintotheliver,combinedwithmodernscientificresearchandtechnologytoexplorethatreducingenzymehepatoprotectiveeffectmechanismresearchwiththevinegarKadsura.Method:1.Useofhighperformanceliquidchromatography(HPLCconditions:mobile-1phaseofmethanol(A)-water(B),gradientelut

8、ion,flowratewassetto0.8mL·min,detectionat230nm).ThroughstudyingingredientsofthevinegarbeforeandafterKadsura,toexplorecontentinlignanscompoundthev