豚鼠离焦性近视眼模型及rpe细胞跨上皮电阻的研究

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1、硕士学位论文学校代码!Q§三圣密级垒五豚鼠离焦性近视眼模型及RPE细胞跨上皮电阻的研究TheResearchofguineapigmyopiamodelandtheTERvalueofculturedretinalpigmentepithelialOteE)cellsinvitro作者姓名：学科专业：研究方向：学院(系、所)：指导教师：副指导老师：豆秀琼临床医学眼科学湘雅医院吴小影教授毛俊峰副教授论文答辩日删丛乡答懒会i∽k中南大学2013年5月原创性声明本人声明，所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了论文中特别加以标注和致谢的

2、地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得中南大学或其他单位的学位或证书而使用过的材料。与我共同工作的同志对本研究所作的贡献均已在论文中作了明确的说明。作者签名：王毳弹日期：韭年』月丛日学位论文版权使用授权书本人了解中南大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留学位论文并根据国家或湖南省有关部门规定送交学位论文，允许学位论文被查阅和借阅；学校可以公布学位论文的全部或部分内容，可以采用复印、缩印或其它手段保存学位论文。同时授权中国科学技术信息研究所将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》，并通过网络向社会公众提供信息服务。作者签名：j

3、醒丝导师签豚鼠离焦性近视眼模型及RPE细胞跨上皮电阻的研究摘要目的：研究建立凹透球镜片诱导的离焦性鼠(guineapig)近视眼模型，观察体外培养的视网膜色素上皮(retinalpigmentepitheliumRPE)细胞的跨上皮Og[N．(transepithelialelectricalresistanceTER)，探讨建立RPE细胞单层屏障模型TER值稳定表达的时间区间。方法：将30只相同批次2周龄三色豚鼠随机分配成两组，即正常组(10只)和单眼离焦模型组(20只)(简称离焦组)，离焦组采用．10．OOD凹透球镜片缝于左眼(离焦眼)前2周；二组均于2周龄和4周龄

4、双眼扩瞳后视网膜检影验光测量屈光度及A超测量仪测定眼轴长度；然后将离焦组豚鼠处死，取左眼RPE细胞进行原代培养，以细胞角蛋白(Cytokeratin)及S．100蛋白为标志物，采用免疫细胞化学染色法鉴定为阳性，传至第2代，接种于Millcell．PET插入式培养池内的微孔滤膜表面，待细胞融合为单层，在含1％血清浓度的培养液培养条件下，采用电阻测量仪连续检测并记录上皮细胞单层的TER值。结果：1．离焦眼的屈光度及眼轴长度的变化离焦眼的近视屈光度增加，离焦组(．3．29+0．72D)与正常组(+3。18士0．50D)及自身对照眼(十1．42+0．60D)比较，差异有统计学意

5、义(p<0．05)：离焦眼的眼轴长度延长，离焦组(8．14-4-0．09mm)与正常组(7．54-4-0．07mrn)及自身对照眼(7．89+0．07ram)比较，差异有统计学意义(p

6、保持其稳定性达8天。结论：1．凹透球镜片诱导可以成功建立豚鼠离焦性近视眼模型；2．体外培养的豚鼠离焦性近视眼RPE细胞生长和传代能力良好：3．体外培养的豚鼠离焦眼性近视眼RPE细胞能形成具有稳定TER值的上皮细胞单层结构，其稳定的TER值至少能维持8天，为下一步的干预研究实验奠定了模型基础。关键词：凹透镜豚鼠RPE跨上皮电阻IITheResearchofguineapigmyopiamodelandtheTERvalueofculturedretinalpigmentepithelial(RPE)cellsinAbstractObject：vitroResearchth

7、eguineapigmyopiamodelinducedbyconcavesphericallens，observethetransepithelialelectricalresistance(TER)ofculturedretinalpigmentepithelial(RPE)cellsinvitro，ExploreandestablethestableexpressiontimeintervalofTERvaluefromthemonolayerbarriermodelofI心Ecell．Methods：Take30guineapig