苹果mlo基因家族和甘露糖结合凝集素基因的克隆及表达分析

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1、万方数据CloningandExpressionofMLoFamliyand^舭GeneinApple

2、在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得青岛农业大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示了谢意。研究生签名：套观时间：圳≥年6月伊关于论文使用授权的说明本人完全了解青岛农业大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意青岛农业大学可以

3、用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。(保密的学位论文在解密后应遵守此协议)研究生签名：导师签名：孙乞瓦、时间：≥D房年占月／7日时间：kB年<月／夕日万方数据青岛农业大学硕士学位论文摘要以苹果茎和叶为试材，克隆得到苹果的胤0基因家族和甘露糖结合凝集素基因，通过生物信息学分析和荧光定量表达分析，初步探讨尬D基因和甘露糖结合凝集素基因的功能，获得的研究结果如下：l、通过RT_PcR的方法从苹果中克隆出池O家族中的5个成员，分别命名为^纪^纪DJ、_jl纪^纪D2、^纪^让D3、砒04、^纪^纪a哆；其编码蛋

4、白与其他物种MLO蛋白构建进化树分析将枷LO蛋白分为6个亚家族：MdMLOl属于II亚家族，MdML02和MdML03属于V亚家族，MdML04属于I亚家族，MdML05属于Ⅵ亚家族；荧光定量结果表明：尬0基因在苹果不同组织中都有着各自的表达模式；在受到苹果白粉病病原胁迫时朋羽纪G口和^织^牡c)3表达显著上调，推测^纪^纪D2和^纪^扛D3与白粉病发病有关；同时受到机械损伤胁迫和外源SA、MeJA及ACC诱导时，^4锄钇D，、砒012、砒G13、^纪^钇D4和砒O哆都有各自的调控模式，推测A4锄犯0J、砒012、朋锄纪03

5、、^纪^纪D彳和砒0哆参与了机械损伤胁迫和外源sA、MeJA及Acc诱导胁迫过程。2、以苹果幼叶为试验材料，通过同源克隆和RT_PcR方法分离出BLECTIN基因家族中的一个基因，命名为M舰。分析结果表明，克隆得到的脚￡长度为1181bp，包括20bp的5啡编码区、81bp的3啡编码区和一个长度为1080bp编码359个氨基酸的开放阅读框，推测该蛋白质分子量为39．76kD，其等电点为8．72。在构建的脱配系统进化树中，掀^纺E与葡萄的馏￡的关系最近，其次为橹豆的此乩，与苹果的M睨2同源基因进化关系最远。相对荧光定量R1二P

6、CR分析表明，拟删具有组织特异性，在茎中表达量最高，在花中表达量最低；低温胁迫促使此z坳三表达量升高，掀^扭己在机械损伤处理下表达量先升高在降低；外源SA能够诱导MZ尬乩表达上调。关键词：苹果；基因表达；白粉病；^织^红0；^4硼绉E；信号分子万方数据青岛农业大学硕士学位论文Abs仃actAbstract1、Fiveg∞ewereisolated台om印ple孤dweresubsequentlyideIl饰酣邪partofaMn几0gene‰ilybyRT—PCRtechnology，desi印atedas拖『^纪o，、他n

7、扛∞、胁眦仍、讹№叫、朋砒贷，respectively：Pllylogeneticanalysisof廿1epmteillsencodedbymefiVememberofML0细咀ily柚dpmteills∞codedbygenesofMLO仃omotherspeciesiIldicatedt11atmeproteinst11eyencodedfaIlediIltosi)【di啦inctclades．MdM巴02锄dMdML03was讲InofVclade；MdML01，MdML04柚dMdML05respcctivelyb

8、elongedtoII，IaIldⅥclades．qu锄tutatllVereal-tinlePRC粕alysisshoedtllat^纪^扛0genesiIldi疏renttissueshadnleirownexpressionpattems．111eup-expressionof此n纪