藁本内酯对自发性高血压大鼠的病理性中内膜增生的作用及机制研究

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1、硕士研究生学位论文题目：藁本内酯对自发性高血压大鼠的病理性中内膜增生的作用及机制研究姓名：邓惠坚学号：2111542013院系：临床医学院学位类型：学术学位专业：内科学导师姓名：张卫、卢群（教授）及职称二○一八年五月广东药科大学硕士研究生学位论文分类号：___________密级：__________UDC：___________藁本内酯对自发性高血压大鼠的病理性中内膜增生的作用及机制研究姓名：邓惠坚学号：2111542013院系：临床医学院学位类型：学术学位专业：内科学研究方向：心血管内科导师姓名：张卫、卢群

2、论文提交日期：2018年3月论文答辩日期：2018年5月学位授予单位：广东药科大学二○一八年五月广东药科大学硕士研究生学位论文TheEffectandMechanismsofLigustilideonPathologicalIntimalandMedialHyperplasiainSpontaneouslyHypertensiveratsCandidate：DenghuijianStudentID：2111542013Affiliation：SchoolofclinicalmedicineAcademicDeg

3、reeApliedfor：MasterofMedicineSpeciality：InternalmedicineSupervisor：Prof.ZhangweiandLuqunAssistantSupervisor：Prof.LuqunDayofDefence：May2018Degree-Conferring-Institution：GuangdongPharmaceuticalUniversityMay2018广东药科大学硕士研究生学位论文广东药科大学硕士研究生学位论文藁本内酯对自发性高血压大鼠的病理性中内膜

4、增生的作用及机制研究中文摘要目的：（1）本实验研究藁本内酯（Z-ligustilide,LIG）对自发性高血压大鼠胸主动脉粥样硬化形成病理性中内膜增生的作用。（2）研究藁本内酯抑制自发性高血压大鼠病理性中内膜增生的机制：1）探讨LIG对自发性高血压大鼠血压、血脂指标的作用。2）LIG对自发性高血压大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞(vascularsmoothmusclecells,VSMCs)迁移作用影响。3）LIG对自发性高血压大鼠胸主动脉VSMCs的c-Myc及α-SMA蛋白的表达影响。方法：（1）选取10周龄的

5、雄性自发性高血压大鼠通过采用腹腔注射维生素D360万/U后联合高脂饲料喂养3周的方法，塑造动脉粥样硬化病理性中内膜增生的模型。（2）造模成功后的自发性高血压大鼠分别腹腔注射药物浓度为0，10，20，40mg/kg的藁本内酯2周，同时喂养普通饲料；然后观察并测量自发性高血压大鼠胸主动脉增生的中内膜。（3）通过无创动脉检测仪测量自发性高血压大鼠每周周一上午9点的尾动脉的血压，每次测量3次，取3次血压值的平均值。（4）通过采血针收集每只自发性高血压大鼠下腔静脉的血液2ml，3000r/min离心后取血清检测血脂与钙离

6、子水平。（5）在超净台下提取自发性高血压大鼠胸主动脉的中层组织，通过组织贴壁法培养出大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞。（6）选用血管平滑肌细胞特定蛋白α-SMA抗体通过细胞免疫荧光法来鉴定细胞。（7）采用细胞划痕实验和transwell实验检测藁本内酯对自发性高血压大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞迁移作用的变化。（8）通过蛋白免疫印迹法检测藁本内酯对自发性高血压大鼠体内血管平滑肌细胞c-Myc、α-SMA蛋白水平的表达。（9）实验数据采用SPSS23.0统计软件分析，实验数据先进行正态性检验和方差齐性检验，在方差齐时用单因

7、素方差分析，组间两两I广东药科大学硕士研究生学位论文比较采用LSD(L)法；方差不齐时用非参数检验，当P<0.05时，差异具有统计学意义。结果：（1）造模3周后观察到自发性高血压大鼠胸主动脉中内膜粥样硬化形成并伴有有明显的中内膜增生。（2）藁本内酯在药物浓度10，20，40mg/kg对动脉粥样硬化形成的病理性中内膜增生抑制作用与对照组比较均有显著差异（P<0.001）。（3）藁本内酯在药物浓度10，20，40mg/kg降低自发性高血压大鼠收缩压和舒张压的作用与对照组比较均有显著差异（P<0.001）。（4）藁本

8、内酯在药物浓度为40mg/kg降低自发性高血压大鼠血胆固醇、甘油三酯的作用与对照组比较有统计学差异（P<0.01）。但对低密度脂蛋白、高密度脂蛋白、血钙离子表达水平未见明显差异的影响（P>0.05）。（5）通过在光学显微镜下对细胞的形态学观察及细胞免疫荧光检测得知培养的细胞是所需要的平滑肌细胞。（6）藁本内酯能在药物浓度10，20，40mg/kg对自发性高血压大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞