乳腺癌mirnas表达谱的检测

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1、临床与实验病理学杂志JClinExpPathol2010Apr；26(2)·173·乳腺癌miRNAs表达谱的检测黄金，吴正升，张晴，张诗武，王艳，徐晓春，吴强摘要：目的检测人乳腺癌石蜡组织及人乳腺癌细胞株中miRNAs的表达情况，初步筛选人乳腺癌miRNAs表达谱。方法(1)应用组织微阵列平台，采用原位分子杂交技术对9l例人乳腺癌和26例癌旁乳腺组织标本42种miRNA进行检测；(2)培养人乳腺癌细胞株MDA—MB-231和正常乳腺上皮细胞株HBL一100，分别抽提细胞总RNA，分离小分子RNA，荧

2、光标记后与miRNAs微阵列杂交，通过芯片扫描和数据分析，获得人乳腺癌miRNAs表达谱。结果(1)与癌旁乳腺组织相比，14种miR—NAs在乳腺癌组织中的表达发生了显著变化(P<0．05)，其中9种表达上调，5种表达下调。(2)利用miRNAs微阵列，筛选获得71种与人乳腺癌相关miRNAs，与正常乳腺上皮细胞相比，34种miRNAs表达上调，37种表达下调。结论筛选出与乳腺癌相关的差异表达miRNAs，为进一步研究其在乳腺癌中的作用奠定基础。关键词：乳腺肿瘤；miRNAs；原位杂交；微阵列中图分类

3、号：R737．9；R394文献标识码：A文章编号：1001—7399(2010)02—0173—05MicroRNAexpressionprofileinbreastcancerHUANGJin，wuZheng．sheng，ZHANGQing，ZHANGShi—WU，WANGYan，XUXiao—chun，wuQiang(DepartmentofPathology，AnhuiMedicalUniversity，Hefei230032，China)Abstract：PurposeTodetectthee

4、xpressionprofileofmicroRNAs(miRNAs)inparaffin—embeddedbreastcancertissuesandcelllines．MethodsTheexpressionof42kindsofmiRNAswasdetectedin91casesofbreastcarcinomaand26paracarcinomatoustissuesontissuemicroarraysectionsbyinsituhybridization．Theexpressionpro

5、fileofmiRNAswasdetectedbymiRNAmicroarraytechnique．BeforemiRNAmicroarraydetection，smallmolecularRNAswereisolatedfromculturedhumanbreastcancercelllineMDA—MB-231andnormalhumanmammaryepithelialcellineHBL一100，respectivelyandlabeledbyfluoresceins．ResultsCompa

6、redtoparacarci—noiTlatoustissues，therewere14miRNAsdifferentiallyexpressedinbreastcancertissues，including9up—regulatedand5down-regula—tedmiRNAs．Seventy—onebreastcancer—relatedmiRNAswereidentifiedfromMDA—MB-231cells，comparedtoHBL一100cells，inclu-ding34up—r

7、egulatedand37down—regulatedmiRNAs．ConclusionsThediferentiallyexpressedmiRNAsmayprovideabasisforfur-therstudyingmiRNAfunctionsandrolesinbreastcancer．Keywords：breastneoplasms；miRNAs；insituhybridization；microarrayMicroRNAs(miRNAs)是一类保守的，18—24些miRNAs参与了人类乳腺

8、癌癌形成、癌演进以及个核苷酸的非编码蛋白的单链RNA。成熟的单链转移“。本课题组分别通过原位杂交和miRNAsmiRNA片段与Argonaut蛋白(Ago2)和靶信使RNA微阵列技术检测人乳腺癌miRNAs的表达情况，筛(mRNA)一起整合到由RNA介导的沉默复合体选出与乳腺癌相关的miRNAs，从而为进_一步探讨(RISC)上，通过抑制翻译过程或者促使靶mRNA降其在乳腺癌中的作用奠定基础。解⋯来调控转录后基因的表达过程。因此，miRNAs1材料与方法