黄海绿潮浒苔的形态学观察及分子鉴定

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1、第15卷第5期中国水产科学Vol.15No.52008年9月JournalofFisherySciencesofChinaSeptember2008黄海绿潮浒苔的形态学观察及分子鉴定张晓雯，毛玉泽，庄志猛，柳淑芳，王清印，叶乃好(中国水产科学研究院黄海水产研究所，山东青岛266071)摘要：2008年6月初，黄海中南部海域出现罕见的大面积的绿潮现象，经初步鉴定，认为造成本次绿潮的种类为浒苔属(Enteromorpha)藻类，但是其种一级分类地位的确定成为自绿潮爆发以来最有争议的问题之一。本研究采用形态学观察与分子鉴定相结合的方法，对在黄海海域采集的22个浒苔样品及青岛栈桥海域的漂

2、浮浒苔样品进行了鉴定。结果表明，不同站位的浒苔样品均具有主枝，且高度分枝，但丝状体的长度及宽度有较大差异；藻体色泽也有较大差异，有深绿色、鲜绿色和黄绿色之分；藻体细胞大小差异较大；切片观察表明所有样品都具有浒苔典型的管状结构，且细胞位于单层藻体的中央；ITS及5.8SrDNA序列分析表明23个浒苔样品序列完全一致，由此确定这些浒苔样品均属于同一种浒苔属浒苔(Enteromorphaprolifera)。[中国水产科学，2008，15(5)：822-829]关键词：浒苔；形态学观察；分子鉴定中图分类号：S917.3文献标识码：A文章编号：1005-8737-(2008)05-082

3、2-08绿潮(Greentide)是世界沿海各国普遍发生的藻类。但是由于漂浮浒苔随着分布海域的不同而生态异常现象，在欧洲、亚洲、北美洲和澳大利亚均在形态、色泽以及藻体大小等方面表现出明显的差有记录，主要发生在河口、内湾、潟湖和城市密集的异，根据形态学判断浒苔的分类地位较为困难，在海岸。造成绿潮的主要生物种类是石莼(Ulvasp.)浒苔种一级分类地位的确定上存在较大争议。针和浒苔(Enteromorphasp.)，以石莼居多[1]。绿潮对这一问题，本研究采集了绿潮暴发海域共23个暴发会带来一系列的次生环境危害，如藻体腐败散不同站位的浒苔样品，从形态学观察及分子鉴定两个方面对形成本次

4、绿潮的浒苔进行了研究。旨为发难闻气味，污染空气；藻类堆积可能为有害昆虫确定浒苔的分类地位，为绿潮浒苔的治理提供理论提供繁殖条件，引起害虫暴发；藻类沉积在海底，会依据。引起缺氧和底质腐败，改变沉积物的理化性质，导致水生生物缺氧死亡，对底栖生态系统产生重要影1　材料与方法[2]响等。1.1　取样站位浒苔属藻类广泛分布在世界范围的海洋中，有2008年7月9日至16日，研究人员跟随“北斗”的分布在半咸水或江河中，常生长在潮间带岩石上号科学考察船对卫星照片显示具有大面积绿潮藻或石沼中，或泥沙滩的石砾上，有时也可附生在大类出现的黄海海域(33.5-36°N，120.0-122°E)进行[3]

5、型海藻的藻体上。全世界目前已知的浒苔种类调察，共采集到这一海域中22个站位的浒苔样品，[4]约有80余种，中国约有11种。2008年6月初，其中包括20个站位的飘浮浒苔以及2个站位(J13黄海中南部海域出现大面积的绿潮，经初步鉴定认及J20-1)的拖网样品。青岛的漂浮浒苔样品采自为，造成本次绿潮的种类为浒苔属(Enteromorpha)栈桥潮间带(图1)。收稿日期：2008-08-18；修订日期：2008-08-25.基金项目：国家自然科学基金(40706050，40706048)；国家科技支撑计划项目(2006BAD01A13)；国家高技术发展计划(863计划)项目(2006A

6、A10Z414).作者简介：张晓雯(1981-)，女，助理研究员，主要从事藻类生物学研究.E-mail：Zhangxw@ysfri.ac.cn通讯作者：叶乃好，副研究员.Tel：0532-85822957；E-mail：yenh@ysfri.ac.cn第5期张晓雯等：黄海绿潮浒苔的形态学观察及分子鉴定82336.0°N性1min，54℃退火1min，72℃延伸1min，循环30次；72℃继续延伸10min，4℃保存。PCR产物进36.5°山东QD行琼脂糖电泳，将目的条带回收纯化之后，送北京六ShandongProvinceJ34J33合华大基因科技股份有限公司测序。用于序列分析3

7、5.5°及系统进化分析的浒苔及石莼的ITS及5.8SrDNAJ29J29-1黄海序列从NCBI数据库中下载。用ClustalW软件进行YellowSeaJ01J02J03J04多序列比对及序列相似性分析。用Phylip3.65软件35.0°J05J06J08中的最大简约法(Maximumlikelihood)和Mega4.0J13J11J10软件中的邻接法(Neighbor-Joining)构建系统树，重34.5°J17J19复1000次计算Bootstrap值。江苏Jiangs