肝正修复茶肝损伤保护作用的研究及机制探讨

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1、单位代码10475学号104753101278分类号R965硕士学位论文肝正修复茶肝损伤保护作用的研究及机制探讨学科、专业:药理学研究方向:肿瘤药理与中药药理申请学位类别:医学硕士申请人:黄秀曼指导教师:杜钢军教授二〇一三年五月THESTUDYOFTHEPROTECTIVEEFFECTIONANDMECHANISMOFTHELIVERRESTORATIONTEAONTHELIVERINJURYADissertationSubmittedtotheGraduateSchoolofHenanUniversityinPartialFulfillmentoftheRequ

2、irementsfortheDegreeofMasterofMedicineByHuangXiumanSupervisor:Prof.DuGangjunMay,2013Abbreviation英文缩写英文全称中文全称LRTBLLiverRestorationTeaBoiledLiquid肝正修复茶水煮液LRWELLiverRestorationWineExtractLiquid肝正修复茶酒浸液APParacetamol扑热息痛ETOHEthylAlcohol酒精DXMDexamethasone地塞米松ConAConcanavalinA刀豆蛋白CCl4CarbonT

3、etrachloride四氯化碳ROSOxygenFreeRadicals氧自由基H2O2HydrogenPeroxide过氧化氢DMSODimethylSulfoxide二甲基亚砜MTTThiazolyBulue四甲基偶氮唑蓝ALTAspartateTransaminases天冬氨酸氨基转移酶ASTAlanineTransaminases丙氨酸氨基转移酶TCTotalCholesterol总胆固醇TGTriglyceride甘油三酯TPTotalProtein总蛋白AKPAlkalinePhosphatase碱性磷酸酶LDHLactateDehydrogenas

4、e乳酸脱氢酶TIMP-1Tissueinhibitorofmatrixmetalloproteinase组织金属蛋白酶抑制剂bFGFFibroblastGrowthFactor成纤维细胞生长因子LNLaminin层粘连蛋白ColCollagen胶原TGF-βTransformingGrowthFactor-beta转化生长因子T-SODSuperoxideDismutase超氧化物歧化酶CATCatalase过氧化氢酶GSTGlutathioneS-transferase巯基转移酶GSH-PXGlutathionePeroxidase谷胱甘肽过氧化物酶GSHGlu

5、tathione还原型谷胱甘肽MDAMalondialdehyde丙二醛ELISAEnzyme-linkedImmunosorbentAssay酶联免疫分析摘要肝脏疾病是影响人类身体健康的最主要的疾病之一,然而目前对肝脏损伤暂无治疗效果较明显的药物,肝正修复茶是在河南用于保肝治疗的一种民间组方。本研究的目的是探讨肝正修复茶水煮液、酒浸液的肝损伤保护作用及其可能的作用机制。本课题采用MTT法检测了肝正修复茶水煮液、酒浸液体外对正常小鼠脾淋巴细胞增殖的影响及对H2O2损伤的LO2人肝细胞增殖抑制率的影响;采用扑热息痛(AP)致小鼠急性肝损伤模型、酒精(ETOH)致小鼠

6、急性肝炎模型、地塞米松联合酒精(DXM+ETOH)致小鼠急性脂肪性肝炎模型、刀豆蛋白(ConA)致小鼠急性免疫性肝损伤模型、CCl4致小鼠急性肝损伤及CCl4致小鼠慢性肝损伤(肝纤维化)模型,评价了肝正修复茶水煮液、酒浸液给药后对各种不同因素引起的肝损伤的保护作用;采用DXM+ETOH致小鼠急性脂肪性肝炎模型、CCl4致小鼠急性肝损伤及CCl4致小鼠慢性肝损伤(肝纤维化)模型,检测血清和肝组织中抗氧化酶活性(如过氧化氢酶和超氧化物歧化酶)、TGF-β1和MDA含量,探讨了肝正修复茶肝损伤保护作用的机制。另外,本文测定了肝正修复茶水煮液,酒浸液中总黄酮类化合物的含量

7、及其对DPPH氧自由基的体外清除能力,并与Vc做了比较。体外试验显示:不同浓度的肝正修复茶水煮液与酒浸液对体外培养的小鼠脾脏淋巴细胞的增殖无明显影响,但对H2O2致LO2人肝细胞的损伤有一定的保护作用,可明显降低H2O2对LO2细胞增殖的抑制率,其中0.125%的肝正修复茶水煮液和酒浸液可分别使H2O2对LO2细胞增殖的抑制率从70%下降到37%、28%。体内实验显示:肝正修复茶水煮液和酒浸液可明显降低扑热息痛致急性肝损伤小鼠的肝脏指数(%)及血清中ALT、AST、TG、TC的水平,升高小鼠血清和肝组织中白蛋白和总蛋白的含量,明显改善扑热息痛引起的小鼠肝索排列紊乱

8、、大片坏死

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