聚乙烯吡咯烷酮(pvp)等对小鼠卵子冷冻的作用及影响机制研究

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1、lIllllllIlllllllIllllllllllltllllIHIIIlY2440728土劳交通戈訾1wllFll28l。lll8lll7ll。114lllSHANGHAIJIAOToNGUNlVERSlTY博士学位DOCTORALDISSERTATl0N论文题目聚乙烯吡咯烷酮(PVP)等对小鼠卵子冷冻的作用及影响机制研究学科专业妇产科学作者姓名指导教师答辩日期王瑶狄文教授2013年4月24日论文题目：聚乙烯吡咯烷酮(PVP)等对小鼠罗日子冷冻的作用及影响机制研究学校代码10248培养单位上海交通大学医学院附属仁济医院学科专业妇产科学作者姓名王瑶作者学号0107219153指

2、导教师狄文教授指导小组成员千日成教授(加拿大)赵晓明教授邱丽华副教授答辩日期2013年4月24El2010级博士研究生学位论文聚乙烯吡咯烷酮(PVP)等对小鼠卵子冷冻的作用及影响机制研究Toexplorethefunctionofpolyvinylpyrrolidone㈣onmouseoocytevitrificationconsequenceandthemechanismofinfluence培养单位上海交通大学医学院附属仁济医院学科专业妇产科学研究方向生殖医学申请学位医学科学学位博士研究生王瑶导师狄文教授答辩日期2013年4月22日关键词：卵子，玻璃化冷冻，冷冻保护剂，7_,-

3、-醇，聚乙烯吡咯烷酮(PVP)，浓度，发育上海交通大学博士学位论文上海交通大学学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名：赡El期：l≥年L}月E1上海交通大学博士学位论文上海交通大学学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版

4、，允许论文被查阅和借阅。本人授权上海交通大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。保密口，在年解密后适用本授权书。本学位论文属于不保密口。(请在以上方框内打“4”)学位论文作者签名：指导教师签名：日期：州多年中月日日期：年月日上海交通大学博士学位论文聚乙烯吡咯烷酮(PVP)等对小鼠卵子冷冻的作用及影响机制研究摘要卵子冷冻、胚胎冷冻及卵巢组织的冷冻是目前女性生育力保存的三大主要手段，然而，每项技术都有其优缺点。卵子冷冻主要用于那些目前暂不生育且无男性伴侣又拒绝使用供精的女性，或者因个人、经济、宗教或者道德等原因

5、不能接受胚胎冷冻的患者。另外，对于将要进行可能导致绝育或者其他损伤卵巢功能并且想要保留生育能力的年轻妇女，卵子库提供了这些想要延迟生育年龄的单身妇女人群另一种选择[1，2]。起初，慢速冷冻的方法被视作为胚胎冷冻的金标准，然而，卵子的慢速冷冻法复苏率很低[3-5]。伴随着冷冻技术飞速发展，日前在卵子冷冻的复苏率和妊娠率上有了提高[6-17]。目前，卵子冷冻技术已可被视作为女性生育力保存的标准方案开展应用于临床[1]。虽然，随着冷冻技术的发展和提高，卵子冷冻周期的妊娠率和出生率渐接近于新鲜试管婴儿，但是目前用于卵子冷冻的冷冻保护剂的浓度相对较高，由此而产生的细胞毒性以及后续的卵子、胚胎

6、发育潜能的影响仍旧是我们所关注的重要问题之一。现今，临床主要使用的冷冻保护剂包括乙二醇(EG)、二甲基亚砜(DMSO)、丙二醇(propyleneglyc01)、二羟基聚氧化丙烯醚(1，2-propandiol，PRoH)。我们己知悉，将卵子暴露于高浓度的冷冻保护剂中将会通过毒性和渗透性反应以致其损伤[9]。就当前而言，尚无标准的卵子冷冻金标准方案。在全世界范围，目前卵子冷冻方案普遍使用较高浓度的冷冻保护剂。因此，成功的卵子冷冻最关键是在保证冷冻效率的前提下降低冷冻保护剂的浓度，以减少其毒性。1971年Whittingham运用聚乙烯吡咯烷酮(PVP)作为冷冻保护剂的添加剂，成功地

7、完成了8细胞鼠胚的冷冻及复苏后的第一例冷冻试管婴儿出生。然而，由于上海交通大学博士学位论文在1994年及1997年的一些报道里PVP在冷冻保护剂中的作用尚未明确[19，20]，因此，PVP至今仍未在冷冻领域里广为应用。另外，亦曾有人尝试用PVP替代人血清蛋白(HBA)以冷冻8细胞胚胎[2]，利用PVP可增加冷冻保护剂的粘稠度，形成氢和水的交互反应，从而减轻了冰晶形成的倾向[3]。2007年以来，PvP已被尝试用于添加至牛卵子的冷冻保护剂中，以提高复苏率[4]。然而，其