耐力运动诱导大鼠肾上腺髓质细胞表型转化对eib的影响

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1、中图分类号UDCR562．2610博士学位论文学校代码密级10533耐力运动诱导大鼠肾上腺髓质细胞表型转化对ElB的影响Theeffectofendurancetraining--inducedphenotypicchangesofratadrenalmedullachromaffincellsonEIB作者姓名：贺若曦学科专业：临床医学研究方向：呼吸内科学院(系、所)：湘雅医院指导老师：胡成平教授论文答辩日期垄!笙苎望塑里答辩委员会主席中南大学2013年3月课题完成相关说明。本课题属国家自然科学基金资助项目(

2、NSFC：81070026)原创性声明本人声明，所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了论文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其它人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得中南大学或其它单位的学位或证书而使用过的材料。与我共同工作的同志对本研究所作的贡献均已在论文中作了明确的说明。作者签名：超壹日期：垃年羔月尘日学位论文版权使用授权书本人了解中南大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留学位论文并根据国家或湖南省有关部门规定送交学位论文，允许学位论文被查

3、阅和借阅；学校可以公布学位论文的全部或部分内容，可以采用复印、缩印或其它手段保存学位论文。同时授权中国科学技术信息研究所将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》，并通过网络向社会公众提供信息服务。作者签名：避导师签名日期：鲨年三月尘日耐力运动诱导大鼠肾上腺髓质细胞表型转化对EIB的影响摘要目的：初步阐明耐力运动在大鼠运动性支气管痉挛发病过程中对肾上腺髓质嗜铬细胞结构和功能的影响及其作用机制。方法：对大鼠进行中强度或高强度跑台耐力运动，并分别予NGF抗体、力竭运动或卵清蛋白(ovalbumin，0VA)致敏、

4、激发干预，120只雄性Sprague—Dawley大鼠随机分为15组，每组8只，分别为：正常对照组，力竭运动组，中速训练组，中速训练+NGF抗体组，中速训练+力竭运动组，中速训练+NGF抗体+力竭运动组，高速训练组，高速训练+NGF抗体组，高速训练+力竭运动组，高速训练+NGF抗体+力竭运动组，OVA组，OVA+中速训练组，OVA+中速训练+NGF抗体组，OVA+高速训练组，OVA+高速训练+NGF抗体组。检测大鼠气道阻力以及支气管肺泡灌洗液中白细胞比例；ELISA检测大鼠血清中肾上腺素(Epinephrine

5、，EPI)、神经生长因子(Nervegrowthfactor，NGF)、皮质酮(Corticosterone，CORT)水平；光镜观察大鼠支气管肺组织以及肾上腺髓质的形态学改变；电镜观察大鼠肾上腺髓质嗜铬细胞的超微结构；免疫组化法检测肾上腺髓质中苯乙醇胺·N一甲基转移酶(PhenylethanolamineN—methyltransferase，PNMT)、外周蛋白(Peripherin)的表达；Westernblot法检测p-ERK／ERK、p-p38／p38，p-JNK／JNK以及peripherin蛋白表

6、达量；Real-timePCR以及westernblot法分别检测JMJD3以及Mashl的mRNA和蛋白表达量。TT结果：1．与正常组以及中速训练组比，高速训练组大鼠气道内淋巴细胞浸润明显增加，气道阻力升高；大鼠肾上腺髓质嗜铬细胞出现空泡样变性，嗜铬颗粒减少，出现细胞突起。高速训练组大鼠血清中NGF水平升高，EPI水平下降，肾上腺中PNMT表达下降，peripherin表达上升，同时p-ERK／ERK、JMJD3、Mashl表达均升高；NGF抗体干预能抑制高强度耐力运动所致的上述病理生理改变。2．与正常组对比

7、，力竭运动组大鼠气道阻力增高，肾上腺髓质中血窦扩张，其血清中EPI、CORT水平升高，肾上腺中PNMT、p-ERK表达增高，而血清中NGF、肾上腺中JMJD3及Mashl表达无明显差异。与高速训练组比较，高速训练+力竭运动组大鼠气道淋巴细胞浸润增加，气道阻力升高，肾上腺中peripherin、p-ERK、JMJD3、Mashl的表达均升高。但血清中EPI、CORT、NGF水平均无明显改变。经NGF抗体干预后，高速训练+NGF抗体+力竭运动组大鼠上述病理生理改变均明显改善。3．与正常组以及高速训练组比较，OVA组

8、大鼠气道中淋巴细胞、巨噬细胞、嗜酸性粒细胞、中性粒细胞增多，气道阻力明显升高，血清中NGF水平升高，CORT水平下降。与正常对照组比较，OVA组大鼠肾上腺髓质嗜铬颗粒减少，有细胞突起形成，血清EPI水平下降，大鼠肾上腺中PNMT表达下降，peripherin表达上升，同时p-ERKfERK、JMJD3、Mashl表达均升高。与OVA组对比，oVA+高速训练组大鼠上述病理生理改变进一步加