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《饲养层fgf2表达量对猕猴胚胎干细胞自我更新及多能性的影响》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。
1、动物学研究2008，Aug.29(4)：405-414CN53-1040/QISSN0254-5853ZoologicalResearchdoi:10.3724/SP.J.1141.2008.04405饲养层FGF2表达量对猕猴胚胎干细胞自我更新及多能性的影响1,21,21,21,21,21,21,21,*张敬，魏强，卢斌，陈永昌，陈洪伟，李荣荣，王喜宏，季维智（1.中国科学院昆明动物研究所，云南昆明650223；2.中国科学院研究生院，北京100049）摘要：用转基因和RNA干扰（RNAi）法建立5组不同成纤维细胞生长因子-2（fibr
2、oblastgrowthfactor-2，FGF2）表达量的猕猴耳部皮肤成纤维细胞（MESF）系：过表达FGF2组（f1），过表达的阴性对照组（f2），FGF2RNA干扰组（f3），RNA干扰的阴性对照组（f4）和未作任何处理的对照组（f5）。5组MESF的FGF2表达量相对值为f1：f2：f3：f4：f5＝4∶2∶1∶2∶2；c-fos，TGF-β1，INHBA，Gremlin1在f1中表达量上升，在f3中表达量下降；BMP4，TGF-β2在f1中表达量下降，在f3中表达量上升；表明内源FGF2能够作用于MESF的TGF-β信号通路，引
3、起相关基因表达量的变化。用这些细胞作为饲养层长期培养（10代）猕猴胚胎干细胞（RhESC），结果在f1上培养的RhESC增殖速度都比对照组快，并且c-fos，TGF-β1，INHBA，Gremlin1，Oct-4，Nanog，Sox2表达量均上升，BMP4表达下调；在f3上培养的RhESC增殖较慢，BMP4表达上调，c-fos，TGF-β1，INHBA，Gremlin1，Oct-4，Nanog，Sox2表达下调。5组MESF上培养的RhESC形成的EB均表达各胚层早期标记基因(marker)，说明RhESC的多能性没有受到影响，但表达量有
4、差异，f1上RhESC形成的EB所有marker都低表达。结果表明饲养层的FGF2含量不仅影响自身相关基因的表达，还对RhESC的自我更新有一定的作用。关键词：猕猴；FGF2；饲养层；胚胎干细胞；增殖中图分类号：Q813；Q959.848文献标识码：A文章编号：0254-5853-(2008)04-405-010InfluenceofDifferentFGF2-expressingFeederLayersontheSelf-renewalandPluripotencyofRhesusMonkeyEmbryonicStemCells1,21
5、,21,21,2ZHANGJing,WEIQiang,LUBin,CHENYong-chang,CHEN1,21,21,21,*Hong-wei,LIRong-rong,WANGXi-hong,JIWei-zhi(1.KunmingInstituteofZoology,theChineseAcademyofSciences,KunmingYunnan650223,China;2.GraduateSchooloftheChineseAcademyofSciences,Beijing100049,China)Abstract:Transgen
6、eandRNAiwereusedtoestablishfivedifferentFGF2-expressingmonkeyearskinfibroblast(MESF)celllines,theFGF2over-expressedline(f1),thenegativecontroloff1(f2),RNAinterferedline(f3),thenegativecontroloff3(f4)andthenon-treatedcontrol(f5).TheexpressionratioofFGF2intheselineswasf1:f2
7、:f3:f4:f5=4∶2∶1∶2∶2.Theresultsindicatedthatc-fos,TGF-β1,INHBA,Gremlin1wereupregulatedinf1butdownregulatedinf3,whileBMP4,TGF-β2weredownregulatedinf1butupregulatedinf3,whichimpliedthatendogenousFGF2affectedtheTGF-βsignalingpathwayandtheexpressionlevelofrelatedgeneschangedin
8、MESFs.Furtheranalysisofrhesusmonkeyembryonicstemcells(RhESCs)supportedbytheseMESFsshowedthatRhES
