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《查尔酮合酶基因对转基因植物花色和育性的影响》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在教育资源-天天文库。
1、植物学报1996,38(7):517~524ActaBotanicaSinica查尔酮合酶基因对转基因植物花色和育性的影响3邵莉李毅杨美珠宋云陈章良(北京大学生命科学学院蛋白质工程及植物基因工程国家重点实验室,北京100871)萧师辉(汕头鱼它滨制药公司,汕头515000)摘要查尔酮合酶(chalconesynthase,CHS)是花色素合成途径中的一个关键酶,它在植物中表达量的改变可能影响花的颜色。从矮牵牛(Petuniahybrida)特定发育阶段的花瓣的cDNA中,克隆到查尔酮合酶基因,并正向插入到原核表达载体和含有花椰菜花叶病毒CaMV35S
2、启动子的真核表达载体中,在原核中得到高效表达,并通过土壤农杆菌介导的方法转化矮牵牛。转基因植物的花色不但发生了明显的变异,其育性也受到了影响,不能产生正常花粉粒,成为雄性不育植株。Northern杂交表明,转基因植物花瓣中,内源及外源查尔酮合酶基因转录均受到抑制。关键词查尔酮合酶;花色素;矮牵牛;转化;共抑制aGENEEXPRESSIONOFCHALCONESYNTHASE-A;CHSAGINFLOWERCOLOURALTERATIONSANDMALESTERILITYINTRANSGENICPETUNIA3ShaoLiKLiYiKYangMei2z
3、huKSongYunandChenZhang2liang;TheNationalLaboratoryofProteinEngineeringandPlantGeneticEngineeringYCollegeofLifeSciencesYPekingUniversityYBeijing100871GXiaoShi2hui;TuobinChemicalandPharmacenticalCorporationYShantou515000GAbstractChalconesynthase2A;CHSAGisakeyenzymeinthebiosynthes
4、isofallclassesofflovonoidsKandvariationofitsexpressionmightaffectthecolourofflowers.CHSAgenewasclonedfromflowerpetalsjustcomingintobloomandinsertedinprocaryoticexpressionvectorandeucaryoticvectorwhichcontainsCaMV35Spromoterinasense2orientation.CHSAgenewashighlyexpressedinprocar
5、yoticexpressionsystem.Petunia;Petuniahybri2daGleafdiscsweretransformedbyAgrobacteriumtumefaciencesLBA4404.NotonlyflowercoloursoftheresultedtransgenicplantwerealteredKbutthetransgenicplantsbecamemale2sterile.Northernblottingassaysshowedthatthetranscriptionofbothtransgeneanden2do
6、genousgenesweresuppressedintheflowerpetalsoftransgenicplant.KeywordsChalconesynthase2AMFlovonoidMPetuniahybridaMTransformationMCosup2pressiona收稿日期:1995209215接受日期:1996203207感谢汕头鱼它滨制药公司资助这项研究。本实验室安成才博士在转基因植物的分子检测,梁晓文小姐在转基因植物的摄影,李小华、颜华同志在论文整理过程中所给予的帮助以及潘乃禾遂教授在整个过程中给予的关怀在此一并致谢。3联系作
7、者。Authorforcorrespondence.518植物学报38卷花色的形成与植物体内一类次级代谢产物类黄酮有关。在花色形成中起最主要作用[1]的是花色素。花色素在花瓣中含量的增高或降低都可能改变花的颜色。查尔酮合酶(chalconesynthase,CHS)是花色素合成中的一个关键酶,它催化丙二酰辅酶A的3个乙[2]酸基和对羟基苯丙烯酰辅酶A的一个乙酸基的缩合,产生柚配基查尔酮。查尔酮合酶在植物中表达量的改变可能影响花的颜色。因此我们选择矮牵牛作为模式植物,通过将外源查尔酮合酶基因导入植物体内,研究查尔酮合酶基因对花色的影响。在矮牵牛中,CH
8、S[3]基因组成了一个多基因家族,包括8~10个成员。在植物正常发育过程中,只有CHSA和CHSJ被表达,并