牙鲆卵裂雌核发育家系和f3代家系建立及遗传分析

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1、学校代码：10264研究生学号：M100107277上海海洋大学硕士学位论文牙鲆卵裂雌核发育家系和F3代家系题目：建立及遗传分析EstablishmentandGeneticAnalysisof英文题目：JapaneseFlounder(Paralichthysolivaceus)MitoticGynogenesisandF3Family专业：动物遗传育种与繁殖研究方向：鱼类遗传育种姓名：齐文山指导教师：田永胜研究员二〇一三年五月上海海洋大学学位论文原创性声明本人郑重声明：我恪守学术道德，崇尚严谨学风。所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的

2、成果。除文中已经明确注明和引用的内容外，本论文不包括任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品及成果的内容。论文为本人亲自撰写，我对所写的内容负责，并完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名：日期：年月日上海海洋大学学位论文版权使用授权书学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅或借阅。本人授权上海海洋大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。保密□，在年解密后适用本版权书本学位论文属于不保密□学

3、位论文作者签名：指导教师签名：日期：年月日日期：年月日牙鲆卵裂雌核发育家系和F3代家系建立及遗传分析EstablishmentandGeneticAnalysisofJapaneseFlounder(Paralichthysolivaceus)MitoticGynogenesisandF3Family学位论文完成时间：指导教师签字：答辩委员会成员签字：上海海洋大学硕士学位论文牙鲆卵裂雌核发育家系和F3代家系建立及遗传分析摘要牙鲆(Paralichthysolivaceus)，属鲽形目(Pleuronectiformes)、鲽亚目(Pleuronectoidei)、鲆

4、科(Bothidae)、牙鲆属(Paralichthys)，是我国重要的海水经济鱼类之一。牙鲆在中、日、韩和俄等地区均有分布，其中我国主要分布在渤海、黄海、南海地区。牙鲆经济价值相对较高，但是由于环境、捕捞和工业化发展等多方面因素作用下，其渔获量逐步减少。随着社会经济的发展和市场需求量的增加，海水鱼类的养殖业在我国广阔的沿海地区发展迅速。然而，牙鲆的良种培育却一直跟不上养殖生产的节奏，整个牙鲆养殖产业缺乏优良的牙鲆养殖品种，严重阻碍了牙鲆养殖产业的发展。为此培育具有生长速度快、抗逆性强和品质高的牙鲆新品种，已迫在眉睫。本研究主要在牙鲆的良种选育方面进行了两方面的研究

5、：一，利用静水压法，进行了牙鲆的卵裂雌核发育家系的建立，并在此基础上对近交家系和相关的雌核发育家系群体进行了遗传分析；二，进行了牙鲆F3代家系的建立及其遗传分析。通过对不同家系组合的遗传育种分析，旨在快速挑选出遗传力高、育种值高的优良亲本，并筛选出性状优良的杂交组合群体，为新的牙鲆优良品种的选育工作提供支持。另外在课题进行期间还进行了云纹石斑鱼、牙鲆等鱼类精子冷冻保存研究，以期为牙鲆卵裂雌核发育家系的建立提供技术支持。利用黄海水产研究所鱼类精子冷冻库冷冻保存的鲈鱼精子和2007年构建的优良家系为实验材料，进行了牙鲆卵裂雌核家系的诱导建立、胚胎发育观察、遗传倍性分析及

6、遗传标记检测等相关研究。对卵裂雌核发育诱导结果表明：在水温2为17℃条件下，在利用灭活鲈鱼精子受精后58min，以静水压力为590kg/cm处理6min后，可获得较高的诱导成功率，可达到32.30±3.34%。牙鲆单倍体胚胎在原肠后期时，会出现典型的单倍体综合症性状，很难出膜或者出膜后很快死亡。卵裂雌核发育胚胎与正常二倍体胚胎发育无明显区别，其出膜后与正常仔鱼无异，能正常存活。利用流式细胞仪对三种胚胎进行检测表明：正常二倍体胚胎和卵裂雌核发育胚胎的DNA相对含量在27左右，单倍体的DNA相对含量在17左右，表明进过卵裂雌核发育诱导后，染色体加倍，为二倍体胚胎。对雌核

7、发育I上海海洋大学硕士学位论文家系跟近交家系的平均体重进行了对比，结果表明两者差异极为显著，在生长至6个月时，近交家系平均体重可达50g左右，而雌核发育家系仅仅为22g左右。利用筛选到多态性较高的30对微卫星引物对F0719近交家系跟相应卵裂雌核发育家系进行鉴定与分析，结果表明：30个微卫星位点在近交群体中均表现为杂合的多态基因，第1、2、15、16、19和21位点在卵裂雌核发育家系中表现为纯合的单态性。在其余位点利用卡方检验，均符合等位基因的1：1的遗传分离定律。通过POPGENE软件计算得到近交群体和雌核发育群体的遗传相似性达到0.8139，而其遗传距离为0