不同浓度tnf-α对兔视网膜müller细胞glast影响

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1、-1-万方数据目录中文摘要………………………………………………………………………………1英文摘要………………………………………………………………………………3前言……………………………………………………………………………………5实验一胰蛋白酶消化法体外培养兔视网膜Müller细胞…………………………..8材料与方法…………………………………………………….…………….8结果…………………………………………………………………………12讨论…………………………………………………………………………13结论…

2、………………………………………………………………………15实验二不同浓度TNF-α对兔视网膜Müller细胞生长活性的影响……………..16材料与方法…………………………………………………………………16结果…………………………………………………………………………17讨论…………………………………………………………………………18结论…………………………………………………………………………20实验三不同浓度TNF-α对兔视网膜Müller细胞GLAST表达量的影响……….21材料与方法……………………

3、……………………………………………21结果…………………………………………………………………………22讨论…………………………………………………………………………23结论…………………………………………………………………………25全文小结……………………………………………………………………………27参考文献……………………………………………………………………………28致谢…………………………………………………………………………………34附图…………………………………………………………………………………

4、35综述…………………………………………………………………………………40-2-万方数据英文缩略词缩略词英文全称中文全称DRdiabeticretinopathy糖尿病性视网膜病变PDRproliferativediabeticretinopathy增殖性糖尿病性视网膜病变PVRproliferativevitreoretinopathy增殖性玻璃体视网膜病变FBSfetalbovineserum胎牛血清GFAPgliafibrillaryacidicprotein神经胶质纤维酸性蛋白CRALBPce

5、llularretinaldehyde-bindingprotein胞内视黄醛结合蛋白TNF-αtumornecrosisfactor-alpha肿瘤坏死因子-αGSglutaminesynthase谷氨酰胺原合成酶PBSphosphatebufferedsaline磷酸盐缓冲液DMSOdimethylsulphoxide二甲亚砜VEGFvascularendothelialgrowthfactor血管内皮生长因子GLASTglutamate/aspartatetransporter谷氨酸/天冬氨酸转

6、运蛋白ROSreactiveoxygenspecies活性氧RGCretinalganglioncell视网膜神经节细胞Gluglutamate谷氨酸-3-万方数据福建医科大学医学院硕士研究生学位论文不同浓度TNF-α对兔视网膜Müller细胞GLAST的影响中文摘要目的：利用含不同浓度的TNF-α的条件培养液对兔视网膜Müller细胞进行体外培养，观察兔视网膜Müller细胞的生长变化情况，利用激光共聚焦显微镜结合荧光免疫细胞化学染色法，对在不同浓度TNF-α的作用下兔视网膜Müller细胞的GLA

7、ST进行定位、半定量分析，观察Müller细胞GLAST的变化情况，深入探讨发生在不同浓度TNF-α时，Müller细胞对调节视网膜谷氨酸浓度作用的影响。方法：使用酶消化法培养兔视网膜Müller细胞；通过相差显微镜、HE染色、荧光免疫技术、电镜观察其形态特征及特殊的免疫标记物进行细胞身份鉴定和纯度的评估。分别在培养液TNF-α浓度为0pg/ml、20pg/ml、50pg/ml、100pg/ml、200pg/ml培养条件下培养48h后，通过MTT法测定Müller细胞的生长活性的变化；采用荧光免疫技术

8、，对Müller细胞胞膜上的GLAST进行荧光标记，通过图像分析软件测定平均光密度值观察Müller细胞的GLAST表达的变化。统计学分析：采用SPSS11.0统计软件进行分析，所有数据以均数±标准差表示，采用单因素方差分析，p<0.05有统计学意义。结果：（一）、通过使用酶消化法培养Müller细胞，培养3d后，培养瓶可见散在生长的圆形细胞，第9-10dMüller细胞形态基本稳定，约15d后，可见细胞开始融合；电镜下可见Müller细胞胞浆内含有丰富