c5a反义肽对肺血管内皮细胞与中性粒细胞粘附的影响

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1、·672·中国免疫学杂志2003年第19卷①C5a反义肽对肺血管内皮细胞与中性粒细胞粘附的影响②③巫振洪 吕凤林 胡承香 吴玉章(第三军医大学大坪医院野战外科研究所,大坪400042)  中国图书分类号 R34R392111  文献标识码 A  文章编号 10002484X(2003)1020672205[摘 要] 目的:探讨补体C5a反义肽在C5a过敏毒素介导的肺血管内皮细胞与中性粒细胞粘附中的阻断作用。方法:采用流式细胞术,检测C5a与其反义肽相互作用后再刺激人肺血管内皮细胞(PVEC),对细胞表面粘附分

2、子P选择素(P2Selec2tin)表达的影响;同时通过测定粘附于血管内皮细胞表面的PMN中髓过氧化物酶(MPO)活性,间接反映血管内皮细胞表面粘附的PMN数量的变化。结果:发现反义肽R4可以剂量依赖关系抑制C5a介导的PVEC上粘附分子P2Selectin的表达,当R4浓度为5000ngPml时,可使P2Selectin的表达量下降20%左右,进一步增加R4的浓度,P2Selectin表达量无显著性改变;另外,反义肽R4对PVEC与PMN的粘附也有明显抑制作用,表现为PVEC上粘附的PMN中MPO活性的降低

3、,当R4的浓度增加到5000ngPml,MPO的活性可降低近40%左右。结论:C5a反义肽对C5a过敏毒素的生物学活性具有一定的拮抗作用。[关键词]反义肽;C5a;粘附分子;血管内皮细胞;髓过氧化物酶Blockingeffectsofanti2sensepeptideofC5aontheadhesionbetweenpulmonaryvascularendothelialcellandneutrophilWUZhen2Hong,LBFeng2Lin,HUCheng2Xiangetal.Departmentof

4、Immunology,ResearchInstituteofSurgery&Dap2ingHospital,theThirdMilitaryMedicalUniversity,Chongqing400042,China[Abstract]Objective:Tostudytheblockingeffectsofanti2sensepeptideofC5aontheadhesionbetweenpulmonaryvascularendotheli2alcell(PVEC)andneutrophilresulti

5、ngfromC5aanaphylatoxin.Methods:ItwasdeterminedbyFlowcytometrythatthechangeofadhesionmol2eculeexpressiononPVECandtheactivityofMPOinPMNwasdeterminedafteradhesion.Results:InresponsetoC5aafterinteractionswithseveralconcentrationsofanti2sensepeptideR4,theexpress

6、ionofP2SelectinonPVECdecreasedsignificantlyandreachedtheminimumattheconcentrationof5000ngPml,andtheactivityofMPOinPMNreducedby40%attheconcentrationof5000ngPmlofanti2sensepeptideR4.Conclusion:Theresultssuggestedthatanti2sensepeptideofC5ahassignificantblockin

7、geffectsonC5aanaphylatoxin.[Keywords]Anti2sensepeptide;C5aanaphylatoxin;Adhesionmolecule;Vascularendothelialcells;MPO  反义肽(Anti2sensePeptide)是指DNA正义链的(BiomolecularInteractionAnalysis,BIA)技术,对C5a互补链上,同一读码框所编码形成的多肽。DNA由正、反义肽分子间相互作用的动力学进行了分析,并正义链(SenseStrand)和

8、反义链(Anti2senseStrand)两从中筛选出一条可与C5a分子发生选择性相互作用条链组成,正义链可转录形成mRNA,进而翻译形成的反义多肽。本研究利用体外细胞实验,探讨该反多肽或蛋白质,将此定义为正义肽;而反义DNA链义肽对人C5a介导的肺血管内皮细胞(PVEC)与中理论上也可转录成反义mRNA,它所编码和翻译形性粒细胞(PMN)粘附的阻断作用,为寻找新的C5a成的多肽即为反义肽。大量的研

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