资源描述：
《参麦注射液对ang_诱导培养心肌细胞凋亡的影响》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。
1、·1612·中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology2004,20(9):1612-1616[文章编号]1000-4718(2004)09-1612-05参麦注射液对AngⅡ诱导培养心肌细胞凋亡的影响1,211陈彦静, 郝 然, 黄启福(12北京中医药大学病理学教研室,北京100029;河北北方学院生理学教研室,河北张家口075029)[摘 要] 目的:观察参麦注射液对血管紧张素-Ⅱ(AngⅡ)诱导培养心肌细胞凋亡的影响。方法:乳鼠心肌细胞原代培养,MTT法观察参麦注射液对培养心
2、肌细胞活力的影响;荧光染色、流式细胞仪检测细胞凋亡,Fluo-3荧-7光探针标记测定钙离子荧光强度。结果:AngⅡ(10mol/L)孵育48h后心肌细胞凋亡明显多于对照组(P<0105);参麦注射液(015g/L、110g/L)组心肌细胞活力显著高于AngⅡ组(P<0105);参麦注射液(110g/L)组AngⅡ诱导的心肌细胞凋亡率明显低于AngⅡ组(P<0105),AngⅡ所导致的心肌细胞内钙超载明显轻于AngⅡ组(P<0101)。结论:参麦注射液对AngⅡ诱导的细胞凋亡具有明显的抑制作用,其机制可能与其抑制心肌细胞
3、内钙超载有关。[关键词]参麦注射液;心肌;血管紧张素Ⅱ;凋亡;钙超载[中图分类号]R363[文献标识码]A[1-4] 研究资料表明,心肌细胞凋亡在许多心脏盒:武汉博士德生物工程有限公司;其余试剂均为国病的发生发展中起着重要的病理生理学作用,而局产分析纯。部和全身肾素-血管紧张素系统(rennin-ingiotensin2 主要仪器system,RAS)的激活和心肌细胞凋亡的发生发展密BIO-TEKEL×800酶标仪,倒置荧光显微镜切相关,血管紧张素Ⅱ(angiotensin,Ⅱ,AngⅡ)是(Olympus1x71+
4、制冷摄像头),激光共聚焦显微镜:RAS系统中的一种重要的生物活性物质,影响许多OlympusFV500-I×81;流式细胞仪:美国BD公司疾病的发生和发展,如:高血压、动脉粥样硬化、心肌FACSCalibur型;CO2培养箱超净台(造鑫公司)。缺血再灌流损伤、心室肥厚及心肌纤维化等。动物3 方法实验结果也表明,AngⅡ可诱导体外培养的成年和新311原代新生大鼠心肌细胞的分析、纯化与培养 生大鼠心肌细胞凋亡的发生[5-7]。因此,如何抑制[10]根据文献略作改动,取1-3d的Wistar大鼠(不分AngⅡ诱导的心肌细胞凋
5、亡,对多种心血管疾病的预雌雄,中国医学科学院动物所实验中心提供),心前防具有重要意义。参麦注射液源自古方生脉散,具区碘伏消毒,取出心脏迅速置于无菌0℃的D-有益气复脉、养阴生津的功效,临床上广泛用于治疗Hanks缓冲液中(含肝素5×104U/L),冲洗3次,小心[8,9]心脑血管疾病。已有资料表明,参麦注射液参抑剔除心房及心底大血管,转入青霉素小瓶中,眼科剪制缺氧/缺糖诱导的心肌细胞和神经细胞凋亡及钙将其剪成1mm×1mm×1mm大小组织块,用0106%超载。本实验从细胞水平研究参麦注射液对AngⅡ胰酶和0104%Ⅱ型
6、胶原酶于37℃水浴振荡分次消诱导心肌细胞凋亡的影响并探讨其作用机制。化,每次10min,收集除第1次外的细胞悬液用0℃材 料 和 方 法的DMEM-F12培养基稀释,1000r/min离心10min,弃上清,含10%胎牛血清的DMEM-F12培养基1 材料重悬细胞,CO2孵箱中静置1-2h差速贴壁后,取上 参麦注射液由红参、麦冬组成,每支10mL,含生清,调节细胞密度,加入011mmol/L5-溴脱氧尿苷,药各1g。正大青春宝药业有限公司生产,批号:4分别种于96孔培养板(2-3×10cells/well)、24孔培
7、943033594。DMEM/F12培养基:Gibco-BRL;胎牛血42养板(3-5×10cells/well)培养板、35mm培养皿(5清:Hyclocn;胰蛋白、胶原酶Ⅱ、塞唑蓝(MTT)、5-溴526×10cells/dish)和25cm培养瓶(1×10cells/dish)脱氧尿苷(Brdu)、二甲基亚枫(DMSO)、吖啶橙(AO):中,培养3d后换无血清DMEM-F12培养基培养24Sigma;Fluo-3/AM、F-127:BiotiumInc;Annexinh进行实验。V/PI细胞凋亡试剂盒:北京宝赛生
8、物技术有限公司; 培养的心肌细胞经SABC即用型小鼠抗α-横SABC即用型小鼠抗α-横纹肌肌动蛋白浓缩液试剂纹肌肌动蛋白鉴定心肌细胞纯度。[收稿日期]2004-07-13[修回日期]2004-07-22312参麦注射液对培养心肌细胞活力的影响 培Tel:010-64286965;E-mail:chenyj010@yahoo.co
