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1、基因工程LaboratoryofBioresource,CollegeofFoodScienceandEngineering,NorthwestA&FUniversityWhatisgeneticengineering?•基因工程是指将一种或多种生物体（供体）的基因在体外进行剪切和组合，然后与载体拼接，并通过载体转入到另一种生物体（受体）内，使其按照人们的意愿遗传并表达出新的性状。LaboratoryofBioresource,CollegeofFoodScienceandEngineering,NorthwestA&FUniversityWhatisgenet
2、icengineering?•基因工程的三大要素：•供体•载体（vector）基因工程是指将一种或多种生物体（供体）的•受体基因在体外进行剪切和组合，然后与载体拼接，并通过载体转入到另一种生物体（受体）内，使其按照人们的意愿遗传并表达出新的性状。LaboratoryofBioresource,CollegeofFoodScienceandEngineering,NorthwestA&FUniversityWhatisgeneticengineering?•基因工程的四大技术：•剪切•连接基因工程是指将一种或多种生物体（供体）的•转入基因在体外进行剪切和•检测组合
3、，然后与载体拼接，并通过载体转入到另一种生物体（受体）内，使其按照人们的意愿遗传并表达出新的性状。LaboratoryofBioresource,CollegeofFoodScienceandEngineering,NorthwestA&FUniversity基因工程的六大步骤•目的基因的获得；•载体的制备；•基因和载体的体外重组；•重组基因的导入和重组子的检测；•克隆基因的表达；•基因工程产物的检测或分离。LaboratoryofBioresource,CollegeofFoodScienceandEngineering,NorthwestA&FUnivers
4、ityDNA抽提供体纯DNA剪切或PCR供体细胞载＋体连接受体细胞＋DNA重组分子转入分离纯化复制产品重组子表达从DNA出发的基因工程基本流程示意图LaboratoryofBioresource,CollegeofFoodScienceandEngineering,NorthwestA&FUniversity9.4基因工程中的工具酶与载体9.4.1限制性内切核酸酶（restrictionendonucleases）9.4.2载体（vector）9.4.3DNA连接LaboratoryofBioresource,CollegeofFoodScienceandEng
5、ineering,NorthwestA&FUniversity9.4.1.1限制性内切酶的定义•是一类能够识别双链DNA分子中的某种特定核苷酸序列，并由此切割DNA双链结构的核酸内切酶。LaboratoryofBioresource,CollegeofFoodScienceandEngineering,NorthwestA&FUniversityRestriction/ModificationSystemsLaboratoryofBioresource,CollegeofFoodScienceandEngineering,NorthwestA&FUniversi
6、ty9.4.1.2限制性核酸内切酶的来源•从原核生物中分离纯化•3945多种不同的限制性内切酶•641种商业化，235种不同的识别位点LaboratoryofBioresource,CollegeofFoodScienceandEngineering,NorthwestA&FUniversity9.4.1.3限制性核酸内切酶的命名命名：细菌属名的第1个字母＋种名的前两个字母＋菌株代号（大写）＋空格＋发现次序（罗马数字）例：EcoRⅠ(Escherichia：属名；coli：种名；R：菌株；Ⅰ：发现次序)LaboratoryofBioresource,Coll
7、egeofFoodScienceandEngineering,NorthwestA&FUniversity9.4.1.4限制性核酸内切酶的类型•Ⅰ型：有识别位点，但无特殊切割位点•Ⅱ型：识别4～8bp回文结构位点•切割位点在识别序列内•占总限制性内切酶的93％•Ⅲ型：有特定的识别序列•识别序列不存在二分体式的对称•切割位点在识别序列的下游LaboratoryofBioresource,CollegeofFoodScienceandEngineering,NorthwestA&FUniversity9.4.1.5II型限制性核酸内切酶的特点•粘性末端(sticky
8、end):•两条DNA链
