高效体积排阻色谱法测定黄秋葵多糖相对分子量与分子量分布

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1、高效体积排阻色谱法测定黄秋葵多糖相对分子量与分子量分布裘雅渔1李巧玲1程和勇2(1浙江大学化学系，浙江杭州310027；2杭州师范大学材料系，浙江杭州310058)摘要目的：建立黄秋葵多糖的相对分子量与分子量分布分析方法。方法：应用体积排阻色谱法，色谱柱为TOSOHTSKgel-G4000PWXL(7.8X300mm,madeinJapan)，流动相为0.3M硝酸钠溶液(内含0.02M叠氮钠)，柱温：40℃，示差折光检测器(检测器温度40℃)，流速0．8ml·min-1。结果：根据建立的方法测定，得到黄秋葵多糖

2、的高效凝胶色谱图，计算出黄秋葵多糖的相对分子量及其分布。结论：所用方法简便、快速、准确，可用于黄秋葵多糖的质量控制。关键词：高效体积排阻色谱法；黄秋葵多糖；相对分子量及其分布文章分类号：O65Determinationofthemolecularweight(Mw)andweightdistribution(Mwdistribution)inOkrapolysaccharidebyHPSEC-RIDQIUYa-yu1，LIQiao-ling1，CHENGHe-yong2(1DepartmentofChemist

3、ry，ZhejiangUniversity,Hangzhou，310027China;2DepartmentofMaterials，HangzhouNormalUniversity，Hangzhou,310058China)AbstractObjective：Toestablishthemethodofanalysisthemolecularweight(Mw)andweightdistribution(Mwdistribution)ofOkrapolysaeeharide．Methods：UsingHPSEC

4、-RIDmethod，chromatographicconditioninc1udingTOSOHTSKgel-G4000PWXL(7.8X300mm,madeinJapan)column，themobilephaseisconsistedof0.30MNa2S04(including0.02MNa2N3)at40℃ofthecolumnandtheRIDdetector．Results：Allthemolecularweight(Mw)arebetween32500and34500andal1thedistr

5、ibutionwidtharebelow2.0．conclusion:Thismethodissimple，rapidandaccurateforthecontrolofOkrapolysaccharide．KeyWords：HPSEC-RID；Okrapolysaeeharide；themoleeularweight(Mw)andweightdistribution(Mwdistribution)黄秋葵多糖是从黄秋葵嫩荚果中发现并分离出一种低分子量活性多糖。嫩荚果中，含有特殊香气和风味的粘滑汁液，这种粘滑汁液

6、是由水溶性纤维果胶、半乳聚糖和阿拉伯树胶等组成，具有神奇的功能，这种粘滑汁液即是粘蛋白[1],具有保护肠胃、肝脏和皮肤粘膜作用[2]。并有治疗胃炎、胃溃疡等疾病的效果[3]；这种粘液蛋白还能刺激中枢神经，加速血液循环及促进新陈代谢和全身血管活化[4]，可防治因血管供血不足造成的心脏病、中风、骨质疏松及老年痴呆等疾病[5]。多糖的分子量不是均一的，具多分散性，需要用统计方法表征其平均分子量及其分子量分布[6]。体积排阻色谱(SEC)法采用化学惰性的多孔物质为固定相，按样品中各个组分相对分子质量大小实现分离。另外，

7、熵驱动的SEC分离机制，最大限度地降低了分析物与固定相间的直接作用，大大简化了分离条件，仅使用温和的流动相和简单的洗脱条件就可以实现分离。目前SEC已被广泛应用于多糖大分子的分离[7]。采用SEC色谱分离的方法排除复杂样品基质的干扰，就可以实现更准确的测量。体积排阻色谱法测定多糖的分子量及其分布，具有快速，重现性好等优点在国内外得到了广泛的应用[8]。黄秋葵多糖为水溶性多糖[9]，针对其单糖组成和空间结构与葡聚糖相似，在色谱柱的选择上倾向于更适合于水溶性多糖分离测定用的TOSOHTSKgel-G4000PWXL

8、(7.8X300mm,madeinJapan，葡聚糖的排阻极限为1×106Dalton)。有关黄秋葵多糖的平均分子量及其分子量分布甚少见相关报道，本文应用体积排阻色谱(HPSEC-RID)法测定黄秋葵多糖的平均分子量及其分子量分布[10]，为黄秋葵多糖产品质量控制提供了有效科学依据，也同时为黄秋葵多糖分子大小和药理作用的相关性研究打下了一定实验基础。1实验部分1.1仪器与试药Water