新生与成年土拨鼠肝组织中部分差异表达的基因比较分析

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1、硕士学位论文学校代码：10023学号：$2010007005新生与成年土拨鼠肝组织中部分差异表达的基因比较分析所院：医学实验动物研究所姓名：王响指导教师：秦川教授导师小组：秦川教授张连峰教授魏强教授学科专业：病理学与病理生理学研究方向：乙型肝炎发病机制研究完成日期：二零一三年五月目录摘j耍⋯⋯⋯⋯．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．⋯⋯⋯⋯⋯．．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．．．．⋯⋯⋯⋯⋯．．1Abstract⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．．．．⋯⋯．⋯⋯⋯．．⋯．．．⋯．⋯⋯⋯．．．．．⋯⋯．．⋯．．．．．．．．．．．⋯．．⋯⋯⋯．．

2、2前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．3日Ⅱ舌⋯。⋯⋯⋯．⋯”．⋯。⋯⋯⋯．⋯“⋯”⋯⋯⋯”⋯⋯⋯·⋯⋯⋯”·“···⋯”⋯⋯⋯⋯⋯⋯”一．引言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯16二．材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。17三．方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。19四．结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯32五．讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

3、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。45参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯47缩略语⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。52个人简历⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯53致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．54p困侠学科学院北京协和医学院坝：L毕业论文摘要目前，乙型肝炎病毒(HepatitisBvirus，HBV)仍以其庞大的人口基数威胁着人类的健康和生命。新生儿感染HBV，大部分发展为慢性肝

4、炎，而成年人感染HBV则多发生急性自限性肝炎。HBV导致的慢性肝炎进而发生肝纤维化、肝硬化，最终以肝癌结局，而急性自限性肝炎多以自愈结局。很多科研工作者研究了慢性肝炎和急性自限性肝炎的感染和发病过程，试图寻找HBV在两个年龄段引发不同病症的原因，但未取得太多成果。新生和成年土拨鼠感染土拨鼠肝炎病毒(woodchuckhepatitisvirus，WHV)后，发病状况与对应年龄人类感染HBV后相似。本课题拟用土拨鼠寻找肝组织中可能导致这种预后差异的关键基因。采用全基因组表达谱芯片技术，对比新生与成年小鼠肝组

5、织差异表达基因，选取目的基因，再通过多个物种序列比对，设计简并引物，在土拨鼠肝组织cDNA中扩增对应基因片段，钡0序，再次设计引物，进行实时荧光定量PCR。与新生十拨鼠相比，成年土拨鼠肝细胞中与钙离，‘r重吸收相关基因Dnm1(Dynamin1)、Dnm3(Dynamin3)及Prkcc(ProteinkinaseC，gamma)表达率明显升高，分别上升2．65士0．25倍，1．90土：0．34倍，2．94+0．54倍。钙离子重吸收通路中，Dnml、Dnm3、Prkcc在两组动物肝脏中表达差异最明显，并且

6、在新生组与成年组上拨鼠之间也有明显差异。此类基因造成肝细胞内钙离子浓度的差别，间接影响其中肝炎病毒的复制。这种表达差异很可能是导致两个年龄段动物感染十拨鼠肝炎病毒后转归不同的原因之一。关键词：基冈芯片；土拨鼠；钙离子；土拨鼠肝炎病毒中国医学科学院北京协和医学院硕二l：毕业论文AbstractAtpresent，HBV(HepatitisBvirus)isstillagreatthreattohumanbeingshealthandlifeasaresultofitslargeinfectedpopulat

7、ionbase．NeonatusgetinfectedHBVmostofthemdevelopchronichepatitis，whileinfectedadultsaremorepronetoacuteself-limitedhepatitis．Duringthechronichepatitis，fibroustissueisformedinresponsetoinflammation，thencirrhosissometimes，hepatocellularcarcinomaasaresult．The

8、samesituationalsohappenstowoodchuckcounterpartswhoareinfectedwithWHVfwoodchuckhepatitisvirus)．WedidsomeresearchforkeygeneswhichaccountforthedifferentWHVinfectionprognosis(chronicandacuteself-limitedhepatitis)between