细菌内毒素检测方法验证方案对策

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1、细菌内毒素检测方法验证方案一般内毒素的验证包括：1．鲎试剂灵敏度的验证，目的是复核鲎试剂的灵敏度，如果使用国家标准品，必须与USP标准品进行确认2．干扰实验，－衡量样品是否有干扰，将标准品加入到样品溶液中－系列样品加入鲎试剂是否有影响－将内毒素标准加入不同样品浓度3．样品测试稀释辈数的确认4．结果判断起草人起草日期审核人审核日期批准人批准日期西安力邦制药有限公司资料细菌内毒素检测方法验证方案目的-------------------------------------------------------------------------范围----------------------

2、---------------------------------------------------责任人----------------------------------------------------------------------内容-------------------------------------------------------------------------1.实验材料及用具-------------------------------------------------------2实验准备----------------------------

3、------------------------------------3.具体验证步骤----------------------------------------------------------3.1.鲎试剂灵敏度复核------------------------------------------------3.2..干扰实验资料--------------------------------------------------------------3.3.供试品细菌内毒素检查--------------------------------------------4.验

4、证结论--------------------------------------------------------------附：表1.鲎试剂灵敏度复核记录表2.干扰试验记录表3.细菌内毒素检查记录细菌内毒素检测方法验证方案目的：为确保盐酸罗哌卡因一水合物细菌内毒素检测方法的专属性、灵敏度，保证检测结果可符合质量标准要求，特制定此方案。范围：盐酸罗哌卡因一水合物细菌内毒素检测方法责任人：细菌内毒素检验员、QC主管内容：1.实验材料及用具资料1.1.电子天平1.2.电热干燥箱1.3.恒温水浴箱1.4.水银温度计1.5.旋涡混合器1.6.鲎试剂应提供供应商，批号，规格等信息（具有国家主

5、管部门的批准文号）1.7.细菌内毒素工作标准品如果使用国家标准品，必须增加国家标准品与USP标准品的对应变化确认，即他们具有相同的变化趋势(由中国药品生物制品检定所统一发放的标准品)1.8.细菌内毒素检查用水1.9.实验用具:移液管、凝集管、三角瓶、试管、试管架、洗耳球、时钟、75%酒精棉、剪刀、砂轮。2实验准备2.1.玻璃器皿的洗涤将玻璃器皿放入铬酸洗液或其他热原灭活剂或清洗液中充分浸泡，然后取出将洗液空干，用自来水将残留洗液彻底洗净，再用蒸馏水反复冲洗三遍以上，空干后放入适宜的密闭金属容器中或用锡箔纸包好后再放入金属容器内，放置入烤箱。2.2.除去玻璃器皿表面可能存在的外源性内毒素

6、玻璃器皿置烤箱后，将烤箱调至250℃，待烤箱温度升至设定的温度后开始计时，干烤至少1小时。达到规定时间后，关断电源，待烤箱温度自然降至室温。在不打开金属容器的情况下，可在两天内使用；如果玻璃器皿用锡箔纸包装，在不打开包装的情况下可在两周内使用，否则须再次干烤除去可能存在的外源性内毒素。资料3.具体验证步骤3.1.鲎试剂灵敏度复核3.1.1.实验操作3.1.1.1.细菌内毒素标准溶液的制备USP和CP标准的等效性取细菌内毒素工作标准品一支，轻弹瓶壁，使粉末落入瓶底，然后用砂轮在瓶颈上部轻轻划痕，75%酒精棉球擦拭后启开，启开过程中应防止玻璃屑落入瓶内。按照标准品说明书，加入规定量的细菌内

7、毒素检查用水溶解其内容物，用封口膜将瓶口封严，置旋涡混合器上混合15分钟。然后进行稀释，制备成4个浓度的细菌内毒素标准溶液，即2λ、λ、0.5λ、0.25λ（λ为所复核的鲎试对的标示灵敏度），每稀释一步均应在旋涡混合器上混合30秒钟。3.1.1.2.待复核鲎试剂的准备取规格为0.1ml/支的鲎试剂18支，轻弹瓶壁，使粉末落入瓶底，用砂轮在瓶颈轻轻划痕，75%酒精棉球擦拭后启开备用，防止玻璃屑落入瓶内。每支加入0.1ml检查用水溶解，轻轻转动瓶壁