宫颈病变患者中人乳头瘤病毒分型、定量检测及其意义

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1、硕士研究生学位论文宫颈病变患者中人乳头瘤病毒分型、定量检测及其意义ThedetectionandmeaningofHPVgenotypingandquantitativedeterminationinpatientswithcervicallesion研究生：赵颖专业：临床检验诊断学导师：蔡应木主任技师汕头大学医学院2013年3月中国汕头学位论文原创性声明本论文是我个人在导师指导下进行的工作研究及取得的研究成果。论文中除了特别加以标注和致谢的地方外，不包含其他人或其它机构已经发表或撰写过的研究成果。对本文的研究做出贡献的个人和集体

2、，均已在论文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律责任由本人承担。作者签名：日期：年月日学位论文使用授权声明本人授权汕头大学保存本学位论文的电子和纸质文档，允许论文被查阅和借阅；学校可将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或其它复制手段保存和汇编论文；学校可以向国家有关部门或机构送交论文并授权其保存、借阅或上网公布本学位论文的全部或部分内容。对于保密的论文，按照保密的有关规定和程序处理。作者签名：导师签名：日期：年月日日期：年月日汕头大学医学院硕士学位论文中文摘要背景宫颈癌是女性最常见的恶性肿

3、瘤之一。宫颈脱落细胞学检查能够早期识别宫颈癌及癌前病变因而作为宫颈癌筛查的常规检查项目。但细胞学检查敏感性较低，不能完全满足宫颈癌早期筛查的需要。大量的研究证实感染人类乳头状瘤病毒（Humanpapillomavirus,HPV）是宫颈癌发生的必要原因，几乎100%的宫颈癌中能够检测到HPV感染，研究显示HPV检测对宫颈病变具有较高的敏感性，阴性预测值较高，HPV阴性的妇女5~10年内发生宫颈癌的可能性几乎为零，许多国家已将HPV检测作为宫颈癌早期筛查的一个指标。目前预防性HPV疫苗已经上市，但是只针对少数的几个HPV型别，而世界

4、各个地区的HPV型别的分布有较大差异。我国HPV感染以HPV16和HPV18为主，而HPV58和HPV52有较高的流行趋势。大型流行病学研究显示潮州地区妇女中HPV感染以HPV52为主，HPV16、HPV58次之，但尚未有关于该地区宫颈病变妇女的HPV感染的型别分布的资料。由于大部分HPV感染呈自限性，多数女性尤其是年轻女性经过1~2年，约90%的HPV感染能被机体清除，只有小部分的HPV感染不能清除从而发展为高度上皮内瘤变。因此，如何识别持续性感染并评估其发展成高度上皮内瘤变(cervicalintraepithelialneo

5、plasia,CIN)或宫颈癌的风险是宫颈癌预防和筛查的一个亟需解决的难题。目的确定潮州地区宫颈病变妇女中的HPV感染的型别分布，分析不同宫颈病变中HPV感染的型别分布和高危型HPV的病毒载量情况，探讨HPV型别分布和高危型HPV病毒载量与宫颈病变严重程度以及宫颈癌发生发展的关系。方法1收集潮州市中心医院病理科宫颈液基细胞学检查结果异常患者的脱落细胞标本2运用PCR技术和HybriMax导流杂交技术扩增目的基因并检测21个HPV型别。采用用针对八个高危型HPV的引物并应用实时荧光定量PCR仪定量检测八个高危型HPV。I汕头大学医学

6、院硕士学位论文结果1随着年龄的增长，HPV的检出率逐渐升高，在~30岁、31~40岁、41~50岁和大于50岁妇女中HPV检出率分别为76.7%、83.3%、93.1%和94.9%。随着宫颈病变严重程度的增加，妇女的平均年龄升高，宫颈癌组的平均年龄为44.7岁。2220例样本中共检出192例HPV感染阳性，阳性率为87.3%，随着宫颈病变严重程度的升高，HPV的感染率逐渐上升(P<0.05）。慢性宫颈炎、CIN1、CIN2、CIN3和宫颈癌中HPV检出率分别为65%、86.7%、93.3%、93.8%和94.5%。3此次HPV分型

7、检测共有18个HPV型别被检出，按检出率大小分别为HPV-16，58，33，52，31，18，6，11，68，53，39，51，45，56，66，Cp8304，59，35。其中HPV16检出率最高，检出率为50.9%(112/220)，随着宫颈病变严重程度的增高HPV16的检出率逐渐上升(P<0.05)。HPV58、HPV33和HPV52是仅次于HPV16的三种基因型，其在各级宫颈病变中检出率没有太大变化。4192例HPV感染者中，63例检出两个或者两个以上的型，占32.81％，无论是单纯感染还是多重感染，HPV16都是检出率最高

8、的HPV型别。5实时荧光PCR检出八个高危型HPV的结果显示，220例检测样本中有182个样本检测为阳性，其检出率与HPV分型的检出率基本一致。高危型HPV的病毒载量与宫颈病变的严重程度呈正相关(r=0.373,P<0.001)。年龄超过35岁的妇